Få mere at vide
Invitrogen™ MultiShot™ FlexPlate Stbl3™ Kompetente celler
Beskrivelse
Indeholder
Boks 1:
- MultiShot™ FlexPlate Stbl3™ Kemisk kompetent E. coli
- En plade med 96 brønde, 20μ l pr. brønd
Boks 2:
- pUC19 DNA (10 pg/μ l): 1 hætteglas, 50μ l
- SOC medium: 2 flasker, 10 ml hver
MultiShot FlexPlate Stbl3 Kemisk kompetente E. coli -celler er kloningskompetente celler, der er præ-alikvoteret i en 96-brønds PCR-plade for at øge transformationsproduktiviteten. FlexPlate-formatet kan opdeles i en hvilken som helst kombination af 8-brønds segmenter for at give mulighed for fleksibilitet i transformationsgennemstrømningen.
Opnå bemærkelsesværdig stabilitet af lentivirale vektorer i Stbl3
MultiShot FlexPlate Stbl3 Kompetente celler er designet til kloning af direkte gentagelser fundet i lentivirale ekspressionsvektorer, da disse celler reducerer hyppigheden af homolog rekombination af direkte gentagelser fundet i lentivirale vektorer (f.eks. ViraPower Lentiviral ekspressionskit) og andre retrovirale vektorer (f.eks. ustabilitetstilbøjelige HIV-baserede plasmider). De Stbl3 stamme er blevet brugt til mange applikationer, herunder genomredigering af CRISPR-arbejdsgange (den første originale protokol af Zhang-gruppen i 2013), udvikling af vaccine (herunder SARS-CoV-2-vaccineforskning) og kloning og vedligeholdelse af vektorer med flere gentagelser (f.eks. genkodende protein med gentagen sekvens). Transformationseffektiviteten af MultiShot FlexPlate Stbl3 kemisk kompetente E. coli -celler er> 1 x 10 7 cfu/μ g plasmid DNA.
De Stbl3E. coli- stammen er afledt af HB101-stammen (med et hybrid K-12- og B-stammegenom). Selvom Stbl3 stammen indeholder rec A13-allelen af rec A-mutationen, der reducerer uspecifik rekombinationsforekomst i klonet DNA, evnen til Stbl3 belastning for at opretholde ustabile inserts er angiveligt drevet af andre genetiske egenskaber. Mutationer i Stbl3 methyleringsafhængig restriktionssystem ( mcr B, mrr, og hsd S20) tillader konstruktion af kloning af genomisk DNA. Denne stamme er ende A1+, således er en uspecifik endonuklease I, der fordøjer DNA, til stede i cellerne. Stbl3 giver reproducerbart meget mere plasmid-DNA end DH-stammer (f.eks. 10 gange eller mere plasmid-DNA end TOP10 stamme) og producerer bæredygtigt lentivirus med høj titer.
MultiShot FlexPlate Stbl3 Kompetente celler tilbyder:
• Forventet effektivitet på> 1 x 107 transformanter/μ g plasmid DNA
• Optimal ydeevne til udbredelse af lentivirale vektorer og vedligeholdelse af direkte gentagelser
• Forbedret genomisk DNA-kloningskapacitet ( mcr B, mrr og hsd S20)
• Evne til at producere høje DNA-udbytter
Bemærk: For optimal ydeevne, Stbl3 celler skal dyrkes ved 30 °C for at opretholde plasmid med komplekse gentagelsessekvenser. Ved udførelse af plasmid-DNA-isolering fra Stbl3 celler, der har vildtype endonuklease I ( ende A1+), sikrer, at buffere indeholder 10 mM EDTA. EDTA vil inaktivere endonukleasen og undgå DNA-hak og vektornedbrydning (følg instruktionerne til plasmid-DNA-oprensningskit for ende A1+ E. coli- stammer).
Øg transformationsproduktiviteten med MultiShot FlexPlate-format
FlexPlate er en 96-brønds PCR-plade, der kan bruges i automatiserede væskehåndteringssystemer eller opdeles i 8-brønds segmenter for fleksibilitet i transformationsgennemstrømning. Tilføjelse af DNA til MultiShot FlexPlate Competent Cells kan hurtigt udføres med en flerkanalspipette eller et væskehåndteringssystem. Efter tilsætning af DNA kan cellerne effektivt transformeres ved varmechok ved hjælp af et vandbad, varmeblok eller termisk cykler.
De vigtigste fordele ved MultiShot FlexPlate-format inkluderer:
• Øg gennemløbet, —der er kompatibelt med automatiserede væskehåndteringsplatforme
•Fleksibel —transformation i trin på 8 brønde til hele 96-brønds plade
•Praktiske —kompetente celler præ-aliquoteret i 96-brønds plade, klar til transformation
Genotype
F– mcr B mrr hsd S20(rB)– , mB– ) rec A13 sup E44 ara -14 gal K2 lac Y1 pro A2 rps L20(StrR) xyl -5λ–leu mtl -1
Find den stamme og det format, du har brug for
• Andre Stbl-stammer er tilgængelige med forskellig genetisk baggrund.
• En række E. coli- stammer og formater af kemisk kompetente celler og elektrokompetente celler er også tilgængelige for at hjælpe med at opfylde dine specifikke transformationsbehov.
• For high-throughput transformation, vælg fra vores samling af MultiShot formaterede komp-celler.
• Vi tilbyder bakterievækstmedier i forskellige formater.
Tekniske data
Tekniske data
| Produkttype | Kemisk kompetente celler |
| Indeholder F' Episome | Nej |
| Kloning af methyleret DNA | Ja ( mcrB, mrr ) |
| Indhold og opbevaring | • MultiShot FlexPlate Stbl3 Kompetente celler (1 x 96-brønds plade ved 20μ L/brønd) Opbevar kl– 80 °C. • pUC19 DNA (50μ L ved 10 pg/μ L) Opbevar kl– 20 °C. • SOC Medium (2 x 10 ml) Opbevares ved °4 C eller stuetemperatur. |
| Antibiotikaresistens bakteriel | Ja (streptomycin) |
| Kloning af ustabilt DNA | Ja ( recA13 ) |
| Blå/hvid screening | Nej |
| High-throughput kompatibilitet | Høj |
| Plasmid | Kan bruges til plasmider> 20 kb |
| Forberedelse af umethyleret DNA | Nej |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.