Få mere at vide
Invitrogen™ eBioscience™ Muse Regulatory T Cell Staining Kit #3
Beskrivelse
Indeholder
- Anti-mus CD4 FITC (RM4-5): 50μ g. Brug ved 0,125μ g/test
- Anti-mus CD25 PE (PC61.5): 50μ g. Brug ved 0,06μ g/test
- Anti-mus/rotte Foxp3 PE-Cy5 (FJK-16s): 25μ g. Brug ved 0,5μ g/test
- Rotte IgG2a isotypekontrol PE-Cy5: 25μ g. Brug ved 0,5μ g/test
- Anti-mus CD16/32 (Fc-blok) renset: 50μ g. Bruges ved 1-5μ g/test
- Flowcytometri farvningsbuffer
- Fikserings-/permeabiliseringskoncentrat: 30mL
Sættets indhold:
- Anti-Mouse CD4 FITC (RM4-5): 50 μg —Brug ved 0,125 μg/test
- Anti-Mouse CD25 PE (PC61.5): 50 μg —Brug ved 0,06 μg/test
- Anti-mus/rotte Foxp3 PE-Cy5 (FJK-16s): 25 μg —Anvendes ved 0,5 μg/test
- Rotte IgG2a isotypekontrol PE-Cy5: 25 μg Anvendelse —ved 0,5 g/μtest
- Anti-mus CD16/32 (Fc-blok) Renset: 50 μg —Anvendelse ved 1-5 μg/test
- Flowcytometri farvningsbuffer
- Fikserings-/permeabiliseringskoncentrat: 30mL
- Ikke inkluderet: Isotypekontroller for anti-CD4 (rotte IgG2a, kat. nr. 11-4321) og anti-CD25 (rotte IgG1, kat. nr. 12-4301)
FJK-16s antistoffet reagerer med mus/rotte Foxp3 også kendt som FORKHEAD BOX P3, SCURFIN og JM2; krydsreaktivitet af dette antistof til andre proteiner er ikke blevet bestemt. Foxp3 et 49-55 kDa protein, er et medlem af forkhead/winged-helix-familien af transkriptionelle regulatorer og blev identificeret som genet defekt i 'scurfy' (sf) mus. Konstitutiv høj ekspression af Foxp3 mRNA er blevet vist i CD4+CD25+ regulatoriske T-celler (Treg-celler), og ektopisk ekspression af Foxp3 i CD4+CD25-celler giver en Treg-fænotype i disse celler.
Immunblotting med FJK-16s antistof har kortlagt epitopen til aminosyrerne 75-125 af muse Foxp3-proteinet. Hos mennesker har denne region vist sig at være alternativt splejset på mRNA-niveau. Både de alternativt splejsede og ikke-splejsede isoformer er til stede i CD4+CD25+ undergruppen af lymfocytter. Foreløbige RT-PCR-eksperimenter har ikke afsløret denne alternativt splejsede isoform i musesplenocytter, hvilket tyder på forskellig genregulering hos mus og mennesker.
Intracellulær farvning af musesplenocytter med FJK-16'er under anvendelse af muse Foxp3-farvningssæt og -protokol afslører ca. 2% af de totale splenocytter i C57Bl/6-stammen og ca. 3-5% i BALB/c-musestammen. Flerfarvet flowcytometrisk analyse viser, at ca. 90% af CD4+CD25+-cellerne og 4% af CD4+CD25-cellerne farves med FJK-16'er. B220+, CD11b+, CD11c+ og Ly6G/Gr-1+ celler viser ikke signifikant co-farvning med FJK-16s. Disse data er i overensstemmelse med en nylig rapport, som følger udtryk for Foxp3 ved hjælp af en GFP knock-in (Fontenot et al, 2005).
FJK-16s krydsreagerer med rotte Foxp3 Dette er blevet påvist ved intracellulær farvning af Foxp3 og flowcytometri af rottesplenocytter ved brug af samme metode og reagenser som brugt til musevæv. Bemærk venligst, at CD4- og CD25-antistofferne inkluderet i dette sæt kun genkender museantigenerne. Til farvning af rottevæv, brug venligst (CD4 FITC kat. 11-0040 og CD25 PE kat. 12-0390).
Tekniske data
Tekniske data
| Indhold og opbevaring | 2° til 8 °C. Lysfølsomt materiale. Bruges inden for 6 måneder efter åbning eller inden for datoen angivet på flasken. |
| Mængde | 1 sæt |
| Til brug med (applikation) | Intracellulær farvning, flowcytometri |
| Produktlinje | eBioscience |
| Produkttype | Cellefarvningssæt |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.