Invitrogen™ Mus Ig Isotyping Ucoated ELISA Sæt med plader

Isotypen af et primært antistof og den applikation, det bruges i, kan resultere i baggrundsfarvning. Primær antistofbaggrundsstøj kan være forårsaget af binding til Fc-receptorer på målceller; ved ikke-specifikke interaktioner med cellulære proteiner, kulhydrater og lipider; eller ved celleautofluorescens. Isotypekontrolantistoffer kan fungere som negative kontroller for at hjælpe med at differentiere ikke-specifikt baggrundssignal fra specifikt antistofsignal, fordi de ikke har nogen relevant specificitet for et målantigen. Mens isotypekontroller er mest almindeligt anvendt i flowcytometri, er de nyttige i andre applikationer såsom kromatinimmunpræcipitation (ChIP), immunhistokemi og gelskift. Isotypekontroller bør matche den primære antistofart og isotype, så niveauet af specifik farvning af det primære antistof kan bestemmes nøjagtigt. Hvis der anvendes direkte mærkede primære antistoffer, fungerer isotypekontrollen bedst, hvis den er konjugeret med samme mærke som testantistoffet.