Invitrogen™ EnzChek™ Pyrophosphat Assay Kit

EnzChek Pyrophosphat Assay Kit leverer en hurtig og meget følsom enzymatisk analyse til påvisning af frit pyrofosfat i opløsning. I denne assay påvises dannelsen af et kromoforisk produkt spektrofotometrisk. EnzChek Pyrofosfatdetektionskittet tilbyder en hurtig, bekvem og billig spektrofotometrisk metode til måling af det uorganiske pyrofosfat, der produceres ved en række biokemiske reaktioner, såsom DNA- og RNA-polymerisationer, cyklisk AMP-dannelse af enzymet adenylatcyclase, samt enzymatisk aktivering af fedtsyrer til at danne deres coenzym A-estere. EnzChek Pyrofosfat-assay Kit er en modifikation af vores EnzChek Phosphate Assay Kit. I nærvær af uorganisk fosfat omdannes substratet 2-amino-6-mercapto-7-methylpurin-ribonukleosid (MESG) af purinnukleosidfosforylase (PNP)-enzymet til ribose-1-fosfat og 2-amino-6-merc apto-7-methylpurin. Den enzymatiske omdannelse af MESG resulterer i et skift i absorptionsmaksimum fra 330 nm til 360 nm. EnzChek Pyrophosphat Assay Kit indeholder enzymet uorganisk pyrophosphatase, som katalyserer omdannelsen af pyrofosfat til to ækvivalenter af fosfat. Fosfatet forbruges derefter af MESG/PNP-reaktionen og detekteres ved en stigning i absorption ved 360 nm. Yderligere følsomhed opnås ved at forstærke ét pyrofosfatmolekyle til to fosfatmolekyler.

• Følsomhedsgrænse på 1 mM pyrofosfat (ca. 0,2 μg/ml)
• Har en pH-værdi på 6,5 til 8,5

Aniondetektion, celleanalyse, cellemetabolisme, cellelevedygtighed, proliferation og funktion, cellulær billeddannelse, lægemiddelopdagelse og -udvikling, enzym- og proteinaktivitetsanalyser, screening med højt indhold (HCS), ionisk homeostase og signalering, fosfataseaktivitet, phosphataseaktivitetsanalyser, fosfatasebiologi, proteiner, ekspression, isolation og analyse, mål- og leadidentifikation og validering