Invitrogen™ EnzChek™ Phospholipase A2 Assay Kit

Dette sæt tager et selvstændigt assay for phospholipase A2, PLA2 og kombinerer de nødvendige Ez og lipider til at køre to komplette 96-brønds mikropladeassays, der overvåger aktiviteten i oprensede enzympræparater og cellelysater. De EnzChek Phospholipase A2 Kit giver tilstrækkeligt med reagenser til to mikroplader ved at μbruge 200 L volumener i 96-brønds format til at udføre kontinuerlig fluorometrisk overvågning af PLA2. Dette produkt tilbyder et alternativ til (B7701), (bis-BODIPY FL C11-PC) reagens, ved at levere et PLA2-selektivt substrat og et, der er ratiometrisk, og derved sænke variationer produceret af instrumentering og analysebetingelser. Phospholipase A2 eller PLA2 repræsenterer en familie af enzymer, der hydrolyserer sn-2-esterbindingen af phospholipider. Disse enzymers aktiviteter spiller vigtige roller i kardiovaskulære, inflammatoriske og nervesystemlidelser og i cancer. De EnzChek Phospholipase A2-substrat giver følsom og kontinuerlig hurtig realtidsovervågning af PLA2-enzymaktiviteter. Dette unikke substrat er selektivt for PLA2 og kan bruges enten i en intensitets- eller ratiometrisk baseret detektionstilstand. I intensitetsbaseret detektionstilstand overvåges PLA2-aktiviteten af intensitetsforøgelsen af en enkelt bølgelængde ved ca. 515 nm. I ratiometrisk analyse, som er baseret på den distinkte fluorescensresonansenergioverførsel (FRET) emission af dette substrat før og efter spaltning, detekteres PLA2 ved ændringer i emissionsintensitetsforholdet ved 515/575nm med excitation ved≈ 460 nm. Begge detekteringstilstande giver en enkel metode med lav baggrund, høj følsomhed og høj specificitet for PLA2.

Enzym- og proteinaktivitetsanalyser, lipase- og phopholipaseaktivitet, proteiner, ekspression, isolering og analyse