Invitrogen™ Dextran, Alexa Fluor™ 488; 10.000 MW, anionisk, fikserbar

Mærkede dextraner er hydrofile polysaccharider, der oftest bruges i mikroskopiundersøgelser til at overvåge celledeling, spore bevægelsen af levende celler og til at rapportere de hydrodynamiske egenskaber af den cytoplasmatiske matrix. Den mærkede dextran indføres almindeligvis i cellerne via mikroinjektion.

Dextran specifikationer :
• Etiket (Ex/Em): Alexa Fluor™ 488 (495/519)
• Størrelse: 10.000 MW
• Oplade: Anionisk
• Fixable: Fixerbar via frie

aminer Høje fremstillingsstandarder for Molecular Probes™ Dextrans
Vi tilbyder mere end 50 fluorescerende og biotinylerede dextrankonjugater i flere molekylvægtsintervaller. Dextraner er hydrofile polysaccharider kendetegnet ved deres moderate til høje molekylvægt, gode vandopløselighed og lave toksicitet. De udviser også generelt lav immunogenicitet. Dextraner er biologisk inerte på grund af deres ualmindelige poly-(α -D-1,6-glucose)-bindinger, som gør dem resistente over for spaltning af de fleste endogene cellulære glycosidaser.

I de fleste tilfælde, Molecular Probes™ fluorescerende dextraner er meget lysere og har højere negativ ladning end dextraner, der er tilgængelige fra andre kilder. Desuden bruger vi strenge metoder til at fjerne så meget ukonjugeret farvestof, som det er praktisk muligt, og analyserer derefter vores dextrankonjugater ved tyndtlagskromatografi for at sikre fraværet af forurenende stoffer med lav molekylvægt.

Et bredt udvalg af substituenter og molekylvægte
Molecular Probes™ dextraner er konjugeret til biotin eller en lang række fluoroforer, herunder syv af vores Alexa Fluor™ farvestoffer (Molecular Probes dextrankonjugater –Tabel 14.4) og er tilgængelige i disse nominelle molekylvægte (MW): 3.000; 10.000; 40.000; 70.000; 500.000; og 2.000.000 dalton.

Dextran-nettoladning og fikserbarhed
Vi anvender succinimidyl-kobling af vores farvestoffer til dextranmolekylet, hvilket i de fleste tilfælde resulterer i en neutral eller anionisk dextran. Reaktionen bruges til at producere Rhodamine Green™ og Alexa Fluor™ 488 dextraner resulterer i, at slutproduktet er neutralt, anionisk eller kationisk. De Alexa Fluor™ , Cascade Blue™ , lucifergul, fluorescein og Oregon Green™ dextraner er iboende anioniske, hvorimod de fleste af dextranerne er mærket med den zwitterioniske rhodamin B, tetramethylrhodamin og Texas Red™ farvestoffer er i det væsentlige neutrale. For at producere mere højt anioniske dextraner har vi udviklet en proprietær procedure til at tilføje negativt ladede grupper til dextranbærerne; disse produkter er udpeget“ polyanionisk” dextrans.

Nogle applikationer kræver, at dextran-sporstoffet behandles med formaldehyd eller glutaraldehyd til efterfølgende analyse. Til disse applikationer tilbyder vi“ lysinfikserbar” versioner af de fleste af vores dextrankonjugater af fluoroforer eller biotin. Disse dextraner har kovalent bundne lysinrester, der tillader dextransporere at blive konjugeret til omgivende biomolekyler ved aldehyd-medieret fiksering til efterfølgende påvisning ved immunhistokemiske og ultrastrukturelle teknikker. Vi har også vist, at alle vores 10.000 MW Alexa Fluor™ dextrankonjugater kan fikseres med aldehyd-baserede fikseringsmidler.

Nøgleapplikationer ved brug af mærkede dextraner
Der er et væld af citater, der beskriver brugen af mærkede dextraner. Nogle af de mest almindelige anvendelser inkluderer:
• Neuronal sporing (anterograd og retrograd) i levende celler
•Cellelinjesporing i levende celler
•Neuroanatomisk sporing
•Undersøgelse af intercellulær kommunikation (f.eks. i gap junctions, under sårheling og under embryonal udvikling)
•Undersøgelse af vaskulær permeabilitet –og blod-hjernebarriereintegritet
•Sporing af endocytose
•Overvågning af forsuring (–nogle dextranfarvestofkonjugater er pH-følsomme)
•Undersøgelse af de hydrodynamiske egenskaber af den cytoplasmatiske matrix.

Dextran-konjugater er generelt opløselige i vandige buffere til mindst 10 mg/ml. Deres opløseligheder falder, når molekylvægten stiger; således er den maksimale opløselighed i vandig buffer ca. 100 mg/ml for 3.000 MW dextraner, 50 mg/ml for 10.000 MW dextraner, 25 mg/ml for 70.000 MW dextraner og –5 10 mg/ml for 500.000 og 02.000 dextraner.

Kun til forskningsbrug. Ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug af dyr eller mennesker.