Invitrogen™ DAF-FM Diacetate (4-Amino-5-Methylamino-2',7'-Difluorofluorescein Diacetate)

Det er i det væsentlige ikke-fluorescerende, indtil det reagerer med NO for at danne en fluorescerende benzotriazol. DAF-FM fluorescens kan detekteres af ethvert instrument, der kan detektere fluorescein, herunder flowcytometre, mikroskoper, fluorescerende mikropladelæsere og fluorometre.

• Ex/Em af DAF-FM: ca. 495/515 nm
• Lyofiliseret produkt skal opløses ved hjælp af DMSO og derefter tilsættes til en vandig buffer for at skabe en fungerende opløsning
• DAF-FM-diacetat er cellegennemtrængende og diffunderer passivt over cellulære membraner; en gang inde i cellen, omdannes den til celle-impermeant for
• Buffere indeholdende bovint serumalbumin (BSA) og phenolrødt kan påvirke fluorescens og bør bruges med forsigtighed
• Fluorescens kvanteudbytte af DAF-FM er ca. 0,005, men stiger omkring 160 gange, til∼ 0,81, efter at have reageret med NO
• Vurdering af NO-produktion i transaldolase-deficiente lymfoblaster ved flowcytometri
• Påvisning af NO-akkumulering i embryonale kortikale neuroner efter neurotrophin-stimulering
• in vivo billeddannelse af NO i zebrafisk

• ntravital mikroskopisk påvisning af NO-generering forbundet med angiogenese hos mus
• Kvantificering af ATP-induceret NO-frigivelse i kaninblodplader
• Spectra af NO-adduktet af DAF-FM er uafhængige af pH over pH 5,5
• INGEN addukt af DAF-FM er væsentligt mere fotostabil end DAF-2, hvilket betyder ekstra tid til billedoptagelse
• DAF-FM er et mere følsomt reagens for NO end DAF-2 (NO detektionsgrænse for DAF-FM ca. 3nM versus ca. 5nM for DAF-2)

Der henvises til Molecular Probes™ Håndbog for yderligere produktinformation.

Celleanalyse, cellemetabolisme, cellelevedygtighed, spredning og funktion, nitrogenoxidforskning, nitrooxidativ stress