Invitrogen™ Click-iT™ EdU Imaging Kit med Alexa Fluor™ 488, 594 og 647 Azider

De Click-iT EdU Imaging Kit er en prøveversion af vores overlegne alternativ til traditionelle spredningsassays optimeret til fluorescensmikroskopi-applikationer. I dette assay er den modificerede thymidinanalog EdU effektivt inkorporeret i nysyntetiseret DNA og fluorescerende mærket med en lys, fotostabil Alexa Fluor farvestof i en hurtig, meget specifik klikreaktion. Denne fluorescerende mærkning af prolifererende celler er nøjagtig og kompatibel med antistofmetoder på grund af den milde klik-protokol. Dette sæt i prøvestørrelse giver tilstrækkelig EdU til at mærke op til 6 til 30 dækglas og nok Alexa Fluor 488, 594 og 647 azid til at detektere ny DNA-syntese på 2 til 10 dækglas med hver fluorofor. De mest nøjagtige proliferation-detektionsmetoder er baseret på inkorporering og måling af nukleosidanaloger i nysyntetiseret DNA, med bromodeoxyuridin (BrdU) en almindeligt anvendt analog. BrdU-mærket DNA kvantificeres ved hjælp af anti-BrdU-antistoffer efter DNA-denaturering ved hjælp af skrappe metoder (HCl, varme eller enzymer) for at eksponere BrdU-molekylerne. Dette trin er tidskrævende og vanskeligt at udføre konsekvent. Den hårde behandling kan også påvirke prøvens integritet og kvalitet negativt, hvilket gør co-farvning med andre antistoffer udfordrende.

• Enkelt: Virker første gang, hver gang, på kortere tid
• Effektiv: ingen denatureringstrin eller hård behandling påkrævet
• Indholdsrige resultater: bedre bevarelse af cellemorfologi, antigenstruktur og DNA-integritet
• Konsistent: ikke afhængig af variable antistofpartier til påvisning
• Prøveversion

Overlegen spredningsmetode
Click-iT EdU Imaging Kit giver et overlegent alternativ til BrdU-assays til måling af celleproliferation. EdU (5-ethynyl-2'-deoxyuridin) er en nukleosidanalog af thymidin og er inkorporeret i DNA under aktiv DNA-syntese. Med Click-iT EdU, mild fiksering og detergentpermeabilisering er tilstrækkelig for de små molekyle-baserede Click-iT EdU-detektionsreagens for at få adgang til DNA'et. Som en konsekvens heraf Click-iT EdU Imaging Kit er ikke kun let at bruge, men mere præcist og kompatibelt med cellecyklusanalyse og andre intracellulære eller ekstracellulære mål for virkelig indholdsrige resultater.

De Click-iT Assay kan anvendes på celler i kultur eller in vivo efter EdU-administration ved fodring eller injektionsmetoder. Click-iTassay kan bruges med BrdU i dobbeltpulseksperimenter ved at bruge anti-BrdU (klon MoBu-1) antistoffet, som ikke krydsreagerer med EdU. Click-iT-teknologien er kompatibel med immunhistokemiske, immunocytokemiske og fluorescerende farvestoffer, der er fikseringstolerante eller designet til mærkning af fikserede celler.

Celleanalyse, celleproliferation, celleproliferation med klikkemi, cellelevedygtighed, spredning og funktion, cellulær billeddannelse, klikkemi, immunfluorescens (IF), immunfluorescensfarvning og påvisning, mærkningskemi