Invitrogen™ Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 HCS-analyse

De Click-iT EdU Alexa Fluor 647 HCS Assay er et overlegent alternativ til traditionelle proliferationsassays, der er optimeret til billedbehandlingsapplikationer med højt indhold. I dette assay er den modificerede thymidinanalog EdU effektivt inkorporeret i nysyntetiseret DNA og fluorescerende mærket med en lys, fotostabil Alexa Fluor farvestof i en hurtig, meget specifik klikreaktion. Denne fluorescerende mærkning af prolifererende celler er nøjagtig og kompatibel med antistofmetoder på grund af den milde klik-protokol. De mest nøjagtige proliferation-detektionsmetoder er baseret på inkorporering og måling af nukleosidanaloger i nysyntetiseret DNA, med bromodeoxyuridin (BrdU) en almindeligt anvendt analog. BrdU-mærket DNA kvantificeres ved hjælp af anti-BrdU-antistoffer efter DNA-denaturering ved hjælp af skrappe metoder (HCl, varme eller enzymer) for at eksponere BrdU-molekylerne. Dette trin er tidskrævende og vanskeligt at udføre konsekvent. Den hårde behandling kan også påvirke prøvens integritet og kvalitet negativt, hvilket gør co-farvning med andre antistoffer udfordrende.

• Enkelt: Virker første gang, hver gang, på kortere tid
• Effektiv: ingen denatureringstrin eller hård behandling påkrævet
• Indholdsrige resultater: bedre bevarelse af cellemorfologi, antigenstruktur og DNA-integritet
• Konsistent: ikke afhængig af variable antistofpartier til påvisning
• Mindre farligt

Overlegen spredningsmetode
Click-iT EdU Alexa Fluor 647 HCS-assay giver et overlegent alternativ til BrdU-assays til måling af celleproliferation. EdU (5-ethynyl-2'-deoxyuridin) er en nukleosidanalog af thymidin og er inkorporeret i DNA under aktiv DNA-syntese. Med Click-iT EdU, mild fiksering og detergentpermeabilisering er tilstrækkelig for de små molekyle-baserede Click-iT EdU-detektionsreagens for at få adgang til DNA'et. Som en konsekvens heraf Click-iT EdU HCS-assay er ikke kun let at bruge, men mere præcist og kompatibelt med cellecyklusanalyse og andre intracellulære eller ekstracellulære mål for virkelig indholdsrige resultater.

De Click-iT Assay kan anvendes på celler i kultur eller in vivo efter administration af EdU ved fodring eller injektionsmetoder. De Click-iT Assay kan bruges med BrdU i dobbeltpulseksperimenter ved at bruge ant-BrdU (klon MoBu-1) antistoffet, som ikke krydsreagerer med EdU. Click-iT-teknologien er kompatibel med immunhistokemiske, immunocytokemiske og fluorescerende farvestoffer, der er fikseringstolerante eller designet til mærkning af faste celler.

Celleanalyse, cellecyklus, celleproliferation, cellelevedygtighed, proliferation og funktion, cellulær billeddannelse, DNA-replikation og reparation, højindholdsscreening (HCS)