Invitrogen™ CellLight™ ER-RFP, BacMam 2.0

Denne brugsklare konstruktion transficeres ind i celler ved hjælp af BacMam 2.0-teknologi og udtrykker RFP fusioneret til ER-signalsekvensen af calreticulin og KDEL (ER-retentionssignal) med minimal cellulær forstyrrelse. Du kan observere ER-RFP-adfærd i levende celler ved hjælp af fluorescerende billeddannelse og multipleks med andre fluorescerende proteiner eller organiske farvestoffer.

Celler, der udtrykker CellLight konstruktioner kan også fikseres med formaldehyd til multiplekset billeddannelse ved anvendelse af immuncytokemiske teknikker.

BacMam teknologi

CellLight ER-RFP, BacMam 2.0, er en fusionskonstruktion af ER-signalsekvens af calreticulin og KDEL (ER-retentionssignal) og TagRFP, der giver nøjagtig og specifik målretning til cellulær ER-RFP. Denne fusionskonstruktion er pakket i insektvirus baculovirus, som ikke replikerer i humane celler og er udpeget som sikker at bruge med biosikkerhedsniveau (BSL) 1 i de fleste laboratorier. BacMam-teknologi sikrer, at de fleste pattedyrcelletyper transduceres/transficeres med høj effektivitet og minimal toksicitet. Denne forbigående transfektion kan detekteres efter inkubation natten over i op til fem dage, der —er tilstrækkelig tid til at udføre de fleste dynamiske cellulære analyser. Som enhver transfektions-/transduktionsteknik transficerer/transducerer BacMam-metoden ikke alle celler med samme effektivitet, hvilket gør den dårligt egnet til cellulære populationsundersøgelser eller automatiseret billeddannelse/tælling. CellLight reagenser er ideelle til eksperimenter, hvor cellulær eller subcellulær co-lokalisering er påkrævet, eller til cellulære funktionsundersøgelser, der kræver særlig opløsning.

• Hurtigt og bekvemt: blot tilføje CellLight reagens til celler, inkuber natten over, og —billede eller opbevar frosne, analyseklare celler til senere brug
• Meget effektiv: op til 90 % transduktion af en lang række pattedyrcellelinjer, herunder primære celler, stamceller og neuroner
• Fleksibel: co-transducer mere end ét BacMam-reagens til multipleksforsøg eller co-lokaliseringsundersøgelser; kontrollere ekspressionsniveauer nøje ved blot at variere dosis
• Mindre giftig: CellLight reagenser er ikke-replikerende i pattedyrsceller og er velegnede til biosikkerhedsniveau (BSL) 1-håndtering
• Flowcytometer-laserlinjer: 532

Celleanalyse, cellestruktur, cellesporing& Sporing, cellulær billeddannelse, endoplasmatisk retikulum (ER), immuncytokemi (ICC), immunfluorescens (IF), organelsporing