Invitrogen™ MitoTracker™ Farvestoffer til Mitokondrier-mærkning

Rosaminbaserede MitoTracker-farvestoffer til mærkning af mitokondrier
Cellegennemtrængelige MitoTracker-sonder farver aktive mitokondrier i levende celler til mærkning og lokalisering i fluorescerende celleafbildning. Vores rosaminbaserede mitokondriefarvestoffer omfatter MitoTracker Orange CMTMRos, et derivat af tetramethylrosamin, og MitoTracker Red CMXRos, et derivat af X-rosamin. MitoTracker Orange CM-H2TMRos og MitoTracker Red CM-H2XRos er reducerede, ikke-fluorescerende versioner af de rosaminbaserede MitoTracker-farvestoffer, som bliver fluorescerende ved oxidation. Det fluorescerende signal fra de rosaminbaserede MitoTracker-farvestoffer bevares i mitokondrierne, selv efter aldehydfiksering og detergentpermeabilisering, hvilket gør disse mitokondriefarvestoffer fleksible til mange arbejdsgange, herunder anvendelser, der kræver efterfølgende behandling, såsom immuncytokemi eller in situ-hybridisering. MitoTracker rød og orange er velegnede til flerfarvede mærkningseksperimenter, fordi deres fluorescens er godt opløst fra den grønne fluorescens af andre sonder.

Carbocyanin-baserede MitoTracker-farvestoffer til mærkning af mitokondrier
Cellegennemtrængelige MitoTracker-farvestoffer farver aktive mitokondrier i levende celler til mitokondriemærkning og lokalisering i fluorescerende celleafbildning. De carbocyaninbaserede farvestoffer MitoTracker Grøn FM og MitoTracker rød FM ophobes i aktive mitokondrier, men tilbageholdes ikke godt i mitokondrier efter aldehydfiksering. Den carbocyaninbaserede MitoTracker mørkerød FM farver aktive mitokondrier i levende celler og fastholdes godt i mitokondrier efter aldehydfiksering og efterfølgende permeabilisering med detergenter til anvendelser, der kræver efterfølgende behandling, såsom immunocytokemi eller in situ-hybridisering. MitoTracker rød FM og MitoTracker mørkerød FM er velegnede til flerfarvede mærkningseksperimenter, fordi deres røde fluorescens er godt opløst fra den grønne fluorescens af andre sonder.

Fordele ved at bruge MitoTracker-farvestoffer til mærkning af mitokondrier
MitoTracker-farvestoffer leveres i hætteglas med 50 μg lyofiliseret pulver klar til rekonstitution. For at mærke mitokondrier skal levende celler blot inkuberes med den MitoTracker-sonde, du vælger. De mitokondrielle farvestoffer diffunderer passivt over plasmamembranen og ophobes i aktive mitokondrier. MitoTracker-farvestofferne tilbydes i en række bølgelængder og kan bruges til mitokondrielokalisering i flerfarveeksperimenter.

Konventionelle fluorescerende farvestoffer som tetramethylrosamin og rhodamin 123 bindes let af aktive mitokondrier og er reversible i målinger af dynamisk membranpotentiale, da de let vaskes ud af cellerne ved tab af membranpotentiale. I modsætning hertil indeholder MitoTracker-farvestoffer en mildt thiolreaktiv chlormethyldel, så mitokondriefarvningen bevares, hvis mitokondriernes membranpotentiale mistes, hvilket gør, at mange af MitoTracker-farvestofferne kan bevares under cellefiksering.

Gennem hele cellens livscyklus bruger mitokondrier oxiderbare substrater til at skabe en elektrokemisk protongradient på tværs af mitokondriemembranen (hvis potentiale er negativt), hvilket resulterer i ATP-produktion. MitoTracker-farvestoffer er ideelle sonder til mitokondrierfarvning i eksperimenter, der studerer cellecyklussen eller processer såsom apoptose og andre slutpunktsassays. MitoTracker-farvestoffer fås også til flowcytometri (kat. nr. M46750, M46751, M46752 og M46753).

Relaterede produkter til mitokondrielt membranpotentiale
Til specifikke studier af mitokondriernes dynamiske membranpotentiale anbefaler vi at bruge JC-1 (kationisk carbocyaninfarvestof, kat. nr. T3168) eller TMRM (tetramethylrhodaminmethylester, kat. nr. I34361) farvestoffer. MitoProbe JC-1-assaysættet (kat.nr. M34152) indeholder JC-1-farvestoffet ud over den potente mitokondrielle membranpotentialeafbryder, CCCP, som depolariserer mitokondriemembranen. Disse reagenser kan give kompenserende kontroller for at kompensere korrekt for forholdet mellem grøn og rød fluorescens. TMRM bruges til påvisning af dynamisk måling af mitokondriel membranpotentiale.