Sartorius™ Microsart™ ATMP Mycoplasma

Hurtig påvisning af Mycoplasma-kontamination i Advanced Therapy Medicinal Products (ATMP) er meget vigtig. Med Microsart™ ATMP Mycoplasma, testtiden kan reduceres fra uger til kun tre timer. Derudover TaqMan™ probe tilføjer høj specificitet til PCR-systemet og minimerer resultatfortolkning. De Microsart™ ATMP Mycoplasma er blevet effektivt valideret i henhold til EP 2.6.7 i kombination med EP 2.6.21 med hensyn til detektionsgrænsen for alle listede Mycoplasma-arter, specificitet og robusthed for autologe celletransplantationer (f.eks. chondrocytter).

Effektive anvendelser Mycoplasma er til stede i de fleste cellekulturfaciliteter og vævskulturlaboratorier. Det anslås, at Mycoplasma er ansvarlig for op til 60 % af cellekulturkontaminationen. De Microsart™ ATMP Mycoplasma real-time PCR kit er specielt designet til hospitaler, institutioner og virksomheder, der er involveret i at teste Mycoplasma kontaminering i henhold til EP 2.6.7 i cellebaserede terapeutiske midler. Det kan bruges til direkte at detektere Mollicutes (Mycoplasma, Acholeplasma, Spiroplasma) i cellekulturer og cellekultur-afledte biologiske stoffer, ATMP'er.

High Performance Mycoplasma detekteres eksplicit ved at amplificere en meget konserveret rRNA-operon, eller mere præcist, en 16S rRNA-kodende region i mycoplasma-genomet. Den mycoplasma-specifikke amplifikation detekteres ved 520 nm (FAM™ kanal). Sættet indeholder en klar til brug Mastermix indeholdende polymerase, primere og FAM™ - og ROX™ - mærkede prober, som tillader specifik påvisning af mollicute arter og en intern kontrol. En detektionsgrænse på mindre end 10 CFU/mL for alle Mycoplasma-arter nævnt i den europæiske farmakopé opfylder kravene til sensitivitet og specificitet og robusthed.

Forebyggelse af kontaminering Sættet indeholder dUTP i stedet for dTTP, så der er mulighed for at nedbryde amplikoner fra tidligere analyser ved hjælp af uracil-DNA glycosylase (UNG). Således kan forekomsten af falsk-positive resultater minimeres. UNG er ikke inkluderet i sættet. Den interne amplifikationskontrol detekterer falsk-negative resultater på grund af PCR-hæmmere eller ukorrekt DNA-ekstraktion. Det interne kontrol-DNA kan tilføjes direkte til PCR-masterblandingen for at fungere som en PCR-kontrol eller overvåge ekstraktionsprocessen. Forstærkningen af den interne kontrol detekteres ved 610 nm (ROX™ kanal). Ved at bruge uracil-DNA-glycosylase (UNG), indeholder sættet dUTP i stedet for dTTP for at nedbryde amplikoner fra tidligere analyse ved at bruge uracil-DNA-glycosylase (UNG). Dette minimerer forekomsten af falsk-positive resultater.