Invitrogen™ Lipofectamine™ Stamtransfektionsreagens

Lipofectamine Stamtransfektionsreagens er optimeret til at opnå maksimal effektivitet med minimal tidlig differentiering i en lang række stamceller. Det kan co-levere DNA, RNA og Cas9 ribonucleoprotein (RNP) komplekser. Lipofectamine Stamreagens er kompatibel med en række mediesystemer, inklusive foderfri, og hjælper med at understøtte og forenkle din stamcellekultur-workflow. Forskere kan opnå op til 80% eller bedre transfektionseffektivitet i pluripotente stamceller (PSC'er) og neurale stamceller (NSC'er) og op til 45% i meschenchymale stamceller (MSC'er).

Transficering af stamceller uden at hæmme cellelevedygtighed og cellevækst kan være udfordrende på grund af disse cellers følsomhed. Lipofectamine Stængel er et reagens med lav toksicitet, der kræver lave mængder nukleinsyre, hvilket gør det muligt for dine stamceller at forblive sunde og fortsætte med at formere sig uden at inducere differentiering. Lipofectamine Stamreagens er:

Overlegen i ydeevne op —til 3 gange højere effektivitet på tværs af iPSC'er, hESC'er, NSC'er og MSC'er sammenlignet med andre reagenser
—Alsidigt et reagens til DNA, RNA, Cas9-protein og co-transfektion
—Skånsom mod celler opretholder celleproliferation uden at inducere differentiering
—Fleksibel transficerer —celler i vedhæftning eller suspension et alternativ til elektroporation

Opnå højeffektiv genredigering i stamceller
Genredigeringsapplikationer kræver typisk evnen til at co-levere DNA, RNA og/eller protein til celler. Lipofectamine Stem Transfection Reagent er designet til at co-levere CRISPR/Cas9-komplekser til humane stamceller til højeffektiv genredigering. Dette ene reagens kan bruges til at transficere store DNA-plasmider såsom alt-i-en CRISPR/Cas9 vektorer og co-leverere en række RNA'er, såsom store Cas9 mRNA med tracr/crRNA komplekser eller single guide (sg) RNA, og protein såsom Cas9 protein kombineret med tracr/crRNA eller sgRNA.

Et lavtoksicitetsalternativ til elektroporation
Transficering af stamceller via elektroporationsmetoder kan være udfordrende og besværligt. Elektroporationsprotokoller anbefaler enkeltcellesuspensionskultur for at sikre maksimal effektivitet og minimal toksicitet. Ved at bruge den omvendte transfektionsprotokol, Lipofectamine Stem Transfection Reagent viser sig at være et effektivt og mindre giftigt alternativ til elektroporation for stamceller. Det kræver lave mængder af nukleinsyre for at opnå maksimal transfektionseffektivitet på linje med elektroporation, mens det understøtter fortsat proliferation uden at inducere differentiering.