Få mere at vide
Thermo Scientific™ LanthaScreen™ TR-FRET ER alpha Coactivator Assay Kit
Beskrivelse
De LanthaScreen™ TR-FRET ER alpha Coactivator Assay Kit bruger et ER alpha ligand-bindende domæne (ER alpha-LBD) mærket med glutathion-S-transferase (GST ), et terbium (Tb)-mærket anti-GST-antistof og et fluorescein-mærket coaktivatorpeptid i et homogent mix-and-read assayformat.
Agonist-tilstand
At køre LanthaScreen TR-FRET ER alfa Coactivator Assay i agonisttilstand (for at identificere agonistforbindelser), ER alpha-LBD tilsættes til ligandtestforbindelser efterfulgt af tilsætning af en blanding af fluorescein-coaktivatorpeptid og Tb-anti-GST-antistof. Efter inkubation ved stuetemperatur beregnes TR-FRET 520:495 nm emissionsforholdet og bruges til at bestemme EC50 ud fra en dosisresponskurve for forbindelsen. Baseret på biologien af ER alfa-coactivator peptid-interaktionen er denne ligand EC50 en sammensat værdi, der repræsenterer mængden af ligand, der kræves for at binde til receptoren, bevirke en konformationsændring og rekruttere coactivator-peptid.
Antagonisttilstand
At køre LanthaScreen TR-FRET ER alpha Coactivator Assay i antagonisttilstand (for at identificere antagonistforbindelser), ER alpha-LBD tilsættes til ligandtestforbindelser, efterfulgt af tilsætning af en blanding af agonist, fluorescein-coactivator peptid og terbium (Tb)-mærket anti-GST antistof. Koncentrationen af agonist anvendt i denne tilstand er EC80-koncentrationen som bestemt ved først at køre assayet i agonisttilstand.
Tekniske data
Tekniske data
| Indhold og opbevaring | 1 rør ER alpha Ligand Binding Domain Rekombinant Protein (opbevares ved -68 til -°85 C) 1 rør peptid (opbevares ved -5 til -30 °C) 2 flasker TR-FRET Buffer (opbevares ved -5 til -°30 C) 1 rør Tb-Anti-GST Ab (opbevares ved -5 til -°30 C) 1 rør DTT (opbevar ved -5 til -30 °C) |
| Til brug med (applikation) | Co-Factor Interaction Assay, Nuclear Receptor Assay |
| Produktlinje | LanthaScreen |
| Mængde | 800 x 20μ L-analyser |
| Type | Coactivator Assay Kit |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.