Få mere at vide
Thermo Scientific™ LanthaScreen™ TR-FRET ER alpha Coactivator Assay Kit
Beskrivelse
De LanthaScreen™ TR-FRET ER alpha Coactivator Assay Kit bruger et ER alpha ligand-bindende domæne (ER alpha-LBD) mærket med glutathion-S-transferase (GST ), et terbium (Tb)-mærket anti-GST-antistof og et fluorescein-mærket coaktivatorpeptid i et homogent mix-and-read assayformat.
Agonist-tilstand
At køre LanthaScreen TR-FRET ER alfa Coactivator Assay i agonisttilstand (for at identificere agonistforbindelser), ER alpha-LBD tilsættes til ligandtestforbindelser efterfulgt af tilsætning af en blanding af fluorescein-coaktivatorpeptid og Tb-anti-GST-antistof. Efter inkubation ved stuetemperatur beregnes TR-FRET 520:495 nm emissionsforholdet og bruges til at bestemme EC50 ud fra en dosisresponskurve for forbindelsen. Baseret på biologien af ER alfa-coactivator peptid-interaktionen er denne ligand EC50 en sammensat værdi, der repræsenterer mængden af ligand, der kræves for at binde til receptoren, bevirke en konformationsændring og rekruttere coactivator-peptid.
Antagonisttilstand
At køre LanthaScreen TR-FRET ER alpha Coactivator Assay i antagonisttilstand (for at identificere antagonistforbindelser), ER alpha-LBD tilsættes til ligandtestforbindelser, efterfulgt af tilsætning af en blanding af agonist, fluorescein-coactivator peptid og terbium (Tb)-mærket anti-GST antistof. Koncentrationen af agonist anvendt i denne tilstand er EC80-koncentrationen som bestemt ved først at køre assayet i agonisttilstand.
Tekniske data
Tekniske data
| Indhold og opbevaring | 1 rør ER alpha Ligand Binding Domain Rekombinant Protein (opbevares ved -68 til -°85 C) 1 rør peptid (opbevares ved -5 til -30 °C) 2 flasker TR-FRET Buffer (opbevares ved -5 til -°30 C) 1 rør Tb-Anti-GST Ab (opbevares ved -5 til -°30 C) 1 rør DTT (opbevar ved -5 til -30 °C) |
| Til brug med (applikation) | Co-Factor Interaction Assay, Nuclear Receptor Assay |
| Produktlinje | LanthaScreen |
| Mængde | 800 x 20μ L-analyser |
| Type | Coactivator Assay Kit |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.