Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR-kloningskit til sekventering, med én Shot™ TOP10 Kemisk kompetent E. coli

Hvert sæt bruger pCR™4Blunt-TOPO vektor med specialdesignede sekventeringsprimersteder, der returnerer mere insertsekvens og mindre vektorsekvens fra hver reaktion. Kits inkluderer alt, hvad der er nødvendigt for at klone og udvælge rekombinante vektorer, der indeholder dit foretrukne PCR-fragment.
pCR4Blunt-TOPO vektor : optimeret til sekventering
Vi har fjernet meget af det multiple kloningssted fra pCR4Blunt-TOPO-vektoren for at forkorte afstanden mellem sekventeringsprimersteder og insertstedet til så lidt som 33 bp. Dette betyder, at sekventeringsreaktioner giver mindre vektorsekvens og mere insertsekvens. pCR4Blunt TOPO vektor har steder for fire almindelige sekventeringsprimere: M13 forward, M13 reverse, T7 og T3 . Sættene inkluderer en alikvot af hver.
pCR4Blunt-TOPO klonselektion og -manipulation
PCR4Blunt-TOPO-vektoren indeholder både ampicillin- og kanamycinresistensmarkører og en LacZα -ccdB genfusion til positiv selektion og blå/hvid screening. Vektorens minimerede multiple kloningssted inkluderer stadig flankerende EcoRI-steder til forenklet udskæring af klonede PCR-produkter og et unikt Sse8387I-sted til generering af indlejrede deletioner før sekventering. T7 og T3 promotorer er også til stede til in vitro-transkription.
Forenklet, TOPO-baseret kloning
ved hjælp af TOPO kloningsteknologi, er der ikke behov for PCR-primere indeholdende specifikke sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpræparation eller andre tidskrævende DNA-manipulationstrin. Bare tilføj din PCR-reaktion direkte til den medfølgende topoisomerase-ladede vektor, inkuber 5 minutter og transformer de medfølgende E. coli- kompetente celler.
Effektiv kloning
Med op til 95 % af klonerne, der bærer den ønskede indsats, kan du screene færre kloner, hvilket sparer dig tid og penge. pCR4Blunt-TOPO-vektoren, der bruges i dette sæt, kommer uden udhæng til effektiv ligering af PCR-produkter skabt ved korrekturlæsning af termostabile polymeraser, der efterlader stumpende PCR-produkter.
Standarden inden for kloning
Når det kommer til kloning, TOPO kloningsteknologi har været en pålidelig partner for tusindvis af videnskabsmænd i over ti år. Hurtig, nem at bruge og effektiv, TOPO kloning er blevet anvendt på mange forskellige vektorer til en bred vifte af anvendelser.
Zero Blunt TOPO PCR-kloningskit til sekventering: sætformater
The Zero Blunt; TOPO PCR-kloningskit til sekventering kan købes med en række kompetente celler, der giver forskellige fordele afhængigt af, hvad dine behov er:

• Generel kloning: TOP10 celler (kat. nr. K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Højeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat. nr. K2880-20, K2880-40)
• Generel kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R (kat. nr. K2895-20)
• Hurtig vækst: Mach1™ -T1 R Kemisk ^{Kompetent E. Coli (Kat. Nr. K2835-20)}

Kromatinbiologi, kromatinimmunpræcipitation (ChIP), kloning, methyleringsanalyse, PCR-kloning, RNAi, epigenetik og ikke-kodende RNA-forskning, sekventering af bisulfitbehandlet DNA