Få mere at vide
Invitrogen™ Zero Blunt™ PCR Cloning Kit, uden kompetente celler
Beskrivelse
Indeholder
Zero Blunt™ PCR cloning kits contains: linearized pCR™-Blunt vector, ExpressLink™ T4 DNA ligase , 5X ExpressLink™ T4 DNA ligase buffer, control template, dNTPs, sterile water, and M13 forward and reverse primers. Competent cell kits contain One Shot™ chemically competent E. coli, S.O.C. medium, and a supercoiled control plasmid.
De Zero Blunt™ PCR Cloning Kit bruger den multifunktionelle kloningsvektor pCR™ - Blunt og ExpressLink™ T4 DNA Ligase for at generere et ligeringsprodukt i et fem minutters ligeringstrin ved stuetemperatur.
pCR-Blunt-vektoren giver:
- EcoRI -steder, der flankerer PCR-produktets indsættelsessted til udskæring af insertioner
- T7-promotor/primer-sted til in vitro RNA-transkription og sekventering
- M13 fremadgående og omvendte primersteder til sekventering eller PCR-screening
De Zero Blunt PCR Cloning Kit er designet til at klone stumpe PCR-fragmenter (eller ethvert stumpt DNA-fragment) med en lav baggrund af ikke-rekombinanter. pCR-Blunt-vektoren indeholder det letale E. coliccd B-gen fusioneret til C-terminalen af Lac Z (Bernardα et al., 1994). Ligering af et stumpt PCR-fragment afbryder ekspression af lacZ - αccdB -genfusionen, hvilket tillader vækst af kun positive rekombinanter efter transformation. Celler, der indeholder ikke-rekombinant vektor, dræbes, når transformationsblandingen udplades.
Sætkonfigurationer
De Zero Blunt PCR Cloning Kit tilbydes i en række forskellige konfigurationer: med One Shot™ TOPO10 Kemisk Kompetent E. coli (K2700-20 og K2700-40) og uden kompetente celler (K2750-20 og K2750-40) i 20- og 40-reaktionskitstørrelser.
- Hurtig og bekvem : 5-minutters ligering ved stuetemperatur
- Effektiv : ccd B-gen for positiv selektion resulterer i> 80% kloner med korrekt insert
- Fleksibel : valg af kanamycin eller Zeocin™ resistens for fleksibel antibiotikaudvælgelse
Kloning, PCR Kloning
Ordreinfo
Forsendelsesbetingelser: Tøris
Tekniske data
Tekniske data
| Bakterie- eller gærstamme | Ikke inkluderet |
| Kloningsmetode | Blunt PCR |
| Indhold og opbevaring | Zero Blunt™ PCR-kloningskit indeholder lineariseret pCR™ - stump vektor, ExpressLink™ T4 DNA-ligase, 5X ExpressLink™ T4 DNA-ligasebuffer, kontrolskabelon, dNTP'er, sterilt vand og M13 frem og tilbage primere. Opbevar alle komponenter ved -20 °C. Alle reagenser er garanteret stabile i 6 måneder, når de opbevares korrekt. |
| Format | Sæt |
| Produktlinje | TOPO™ , Zero Blunt™ |
| Produkttype | PCR-kloningskit |
| Promotor | T7 |
| Mængde | 20 reaktioner |
| Vektor | Blunte DNA-kloningsvektorer |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.