Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit til subkloning, med TOP10F' E. coli

Kloningssættene fås med en række kompetente celler eller uden kompetente celler, afhængigt af dine behov og budget. Hvert sæt bruger pCR™ 2.1-TOPO TA-vektor med bekvemme restriktionssteder til subkloning.
pCR 2.1-TOPO TA vektor: kloning og subkloning enkelhed
pCR 2.1-TOPO TA-vektor er lineariseret med 3'-thymidin (T) udhæng til direkte ligering afTaq polymerase-amplificerede PCR-produkter (TA-kloning) og er“ aktiveret” med kovalent bundet Topoisomerase I. Der er ingen grund til at tilføje ligase, og kloningen er fuldført på 5 minutter. EcoRI-steder, der flankerer PCR-produktets indsættelsessted, giver mulighed for nem udskæring af inserts eller brug en hvilken som helst kombination af 15 bekvemme restriktionssteder, der flankerer din PCR-insertion for nem, retningsbestemt subkloning.
pCR 2.1-TOPO TA klon selektion og
manipulation pCR; 2.1-TOPO TA-vektor indeholder både ampicillin- og kanamycinresistensmarkører og Lac Z-genetα til blå/hvid screening.
Forenklet TOPO-baseret kloning
ved hjælp af TOPO kloningsteknologi, er der ikke behov for PCR-primere indeholdende specifikke sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpræparation eller andre tidskrævende DNA-manipulationstrin. Bare tilføj din PCR-reaktion direkte til den medfølgende topoisomerase-ladede vektor, inkuber 5 minutter og transformer E. coli -kompetente celler.
Effektiv kloning Med
op til 95 % af klonerne, der bærer den ønskede indsats, kan du screene færre kloner, hvilket sparer tid og penge. De pCR 2.1-TOPO TA-vektor, der bruges i dette sæt, leveres med 3'-T-udhæng til effektiv ligering afTaq polymerase-amplificerede PCR-produkter, som indeholder 3'-A udhæng.
Standarden inden for kloning
Når det kommer til kloning, TOPO kloningsteknologi har været en pålidelig partner for tusindvis af videnskabsmænd i over ti år. Hurtig, nem at bruge og effektiv, TOPO kloning er blevet anvendt på mange forskellige vektorer til en bred vifte af anvendelser.
TOPO TA Cloning Kits til subkloning: sæt
muligheder Den TOPO TA Cloning Kit til sekvensering kan købes med en række kompetente celler, der giver forskellige fordele afhængigt af dine behov:

• Generel kloning: TOP10 celler (kat. nr. K4500-01, K4500-40)
• Højeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat. nr. K4560-01, K4560-40)
• Generel kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R-celler (kat. nr. K4520-01, K4520-40)
• Hurtig vækst: Mach1™ -T1R Kemisk Kompetent E. Coli (Kat. Nr. K4510-20)
• Giv din egen: for fleksibilitet og for at spare penge (kat. nr. 450641)

• Hurtigt og nemt : gå fra PCR til kloner på kun tre trin og på så lidt som 5 minutter hands-on tid
• Effektiv : opnå op til 95% kloner med korrekt indsættelse
• Bevist : pålidelig ydeevne i over et årti med over 4.000 citater
• Simpelt : ingen ligase, post-PCR procedurer eller PCR-primere indeholdende specifikke sekvenser er påkrævet

• Vektor:pCR 2.1-TOPO TA vektor: subkloningsvektor med 15 praktiske restriktionssteder, der flankerer dit insert for nem, retningsbestemt subkloning
• Kloningsmetode:TOPO TA Cloning : Topoisomerase I-baseret, 5-minutters ligering af PCR-produkter med 3′ -A udhæng (Taq polymerase amplificeret) til TOPO vektor med T-udhæng
• Kompetente celler: forskellige muligheder: vælg mellem sæt med enten generelle, højeffektive, bakteriofag T1-resistente, hurtigtvoksende kompetente celler, eller brug dine egne

Kloning, PCR Kloning