Få mere at vide
Invitrogen™ SuperScript™ III First-Strand Synthesis System
Beskrivelse
Indeholder
Oligo(dT)20 (50 μM), 50 μI; Tilfældige hexamere (50ng/μl), 250 μl; 10X RT-buffer, 1 ml; 0,1 M DTT, 250 μl; 25 mM magnesiumchlorid, 500 μl; 10 mM dNTP-blanding, 250 μl; SuperScript III RT (200 U/μl), 50 μl; RNaseOUT (40 U/μl), 100 μl; E. coli RNase H (2 U/μl), 50 μl; DEPC-behandlet vand, 1,2 ml; Total HeLa RNA (10 ng/μl), 20 μl; Sense Control Primer (10 μM), 25 μl; Antisense Control Primer (10 μM), 25 μl
SuperScript III First-Strand Synthesis System for RT-PCR er optimeret til at syntetisere førstestrengs cDNA fra renset poly(A)+ eller total RNA. RNA-mål fra 100 bp til >12 kb kan detekteres med dette system, og mængden af startmateriale kan variere fra 1 pg til 5 μg samlet RNA. SuperScript III Reverse Transcriptase er en version af M-MLV RT, der er udviklet til at reducere RNase-H-aktivitet og give øget termisk stabilitet. Enzymet bruges til at syntetisere cDNA ved et temperaturområde på 42 – 55 °C, hvilket giver øget specificitet, højere udbytte af cDNA og mere fuldlængdeprodukt end andre reverse transkriptaser. Da SuperScript III RT ikke hæmmes væsentligt af ribosomalt og transfer-RNA, kan det bruges til at syntetisere førstestrengs cDNA fra en total RNA-præparat.
Brug af SuperScript III First-Strand System
cDNA-syntese udføres i første trin ved enten total RNA eller poly(A)+-selekteret RNA primet med oligo(dT), tilfældige primere eller en genspecifik primer. I det andet trin udføres PCR i et separat rør ved brug af primere, der er specifikke for det pågældende gen. For PCR-reaktionen anbefaler vi en af følgende DNA-polymeraser: Platinum Taq DNA-polymerase giver automatiske hot-start-betingelser for øget specificitet op til 4 kb, Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity giver øget udbytte og høj nøjagtighed for mål op til 15 kb, og Platinum Pfx DNA-polymerase giver maksimal nøjagtighed for mål op til 12 kb.
Ordreinfo
Forsendelsestilstand: Tøris
Tekniske data
Tekniske data
| Indhold og opbevaring | • Oligo(dT)20 , 50 μl (50 μM) • Tilfældige hexamere, 250 μl (50 ng/μl) • 10X RT-buffer, 1 ml • DTT, 250 μl (0,1 M) • Magnesiumchlorid, 500 μl (25 mM) • dNTP mix, 250 μl (10 mM) • SuperScript III RT, 50 μl (200 U/μl) • RNaseOUT, 100 μl (40 U/μl) • E. coli RNase H, 50 μl (2 U/μl) • DEPC-behandlet vand, 1,2 ml • Total HeLa RNA, 20 μl (10 ng/μl) • Sense Control Primer, 25μ L (10 μM) • Antisense Control Primer, 25 μL (10 μM) Opbevar ved –20 °C. |
| Format | Kit |
| GC-Rich PCR-ydelse | Høj |
| Reaktionshastighed | 50 min. |
| Teknik | Revers transkription |
| Optimal reaktionstemperatur | 50 °C |
| Mængde | 50 rxns |
| Omvendt transkriptase | SuperScript III |
| Forsendelsestilstand | Tøris |
| Til brug med (applikation) | Realtids-PCR (qPCR), RT-PCR |
| Vis mere |
Må kun benyttes til forskningsformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.