Få mere at vide
Invitrogen™ SuperScript™ III First-Strand Synthesis System
Beskrivelse
Indeholder
Oligo(dT)20 (50 μM), 50 μI; Tilfældige hexamere (50ng/μl), 250 μl; 10X RT-buffer, 1 ml; 0,1 M DTT, 250 μl; 25 mM magnesiumchlorid, 500 μl; 10 mM dNTP-blanding, 250 μl; SuperScript III RT (200 U/μl), 50 μl; RNaseOUT (40 U/μl), 100 μl; E. coli RNase H (2 U/μl), 50 μl; DEPC-behandlet vand, 1,2 ml; Total HeLa RNA (10 ng/μl), 20 μl; Sense Control Primer (10 μM), 25 μl; Antisense Control Primer (10 μM), 25 μl
SuperScript III First-Strand Synthesis System til RT-PCR er optimeret til at syntetisere førstestrengs-cDNA fra oprenset poly(A)+ eller total RNA. RNA-mål fra 100 bp til>12 kb kan detekteres med dette system, og mængden af udgangsmateriale kan variere fra 1 pg til 5 μg total RNA. SuperScript III revers transkriptase er en version af M-MLV RT, der er blevet konstrueret til at reducere RNase H-aktivitet og give øget termisk stabilitet. Enzymet bruges til at syntetisere cDNA ved et temperaturområde på 42–55°C, hvilket giver øget specificitet, højere udbytter af cDNA og mere fuldlængde produkt end andre reverse transkriptaser. Fordi SuperScript III RT hæmmes ikke væsentligt af ribosomalt og transfer-RNA, kan det bruges til at syntetisere førstestrengs-cDNA fra total RNA.
Ved anvendelse af SuperScript III First-Strand System
udføres cDNA-syntese i det første trin under anvendelse af enten total RNA eller poly(A)+-selekteret RNA primet med oligo(dT), tilfældige primere eller en genspecifik primer. I det andet trin udføres PCR i et separat rør under anvendelse af primere, der er specifikke for det pågældende gen. Til PCR-reaktionen anbefaler vi en af følgende DNA-polymeraser: Platinum Taq DNA Polymerase giver automatiske varmstartsbetingelser for øget specificitet op til 4 kb, Platinum High Fidelity Taq DNA Polymerase giver øget udbytte og høj nøjagtighed for mål op til 15 kb, og Platinum Pfx DNA Polymerase giver maksimal nøjagtig for mål op til 12 kb.
Ordreinfo
Forsendelsestilstand: Tøris
Tekniske data
Tekniske data
| Indhold og opbevaring | • Oligo(dT)20 , 50 μl (50 μM) • Tilfældige hexamere, 250 μl (50 ng/μl) • 10X RT-buffer, 1 ml • DTT, 250 μl (0,1 M) • Magnesiumchlorid, 500 μl (25 mM) • dNTP mix, 250 μl (10 mM) • SuperScript III RT, 50 μl (200 U/μl) • RNaseOUT, 100 μl (40 U/μl) • E. coli RNase H, 50 μl (2 U/μl) • DEPC-behandlet vand, 1,2 ml • Total HeLa RNA, 20 μl (10 ng/μl) • Sense Control Primer, 25μ L (10 μM) • Antisense Control Primer, 25 μL (10 μM) Opbevar ved –20 °C. |
| Format | Kit |
| GC-Rich PCR-ydelse | Høj |
| Reaktionshastighed | 50 min. |
| Teknik | Revers transkription |
| Optimal reaktionstemperatur | 50 °C |
| Mængde | 50 rxns |
| Omvendt transkriptase | SuperScript III |
| Forsendelsestilstand | Tøris |
| Til brug med (applikation) | Realtids-PCR (qPCR), RT-PCR |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.