Invitrogen™ En Shot™ TOP10F' Kemisk kompetent E. coli

One Shot TOP10F´ Kemisk kompetente E. coli er identiske med TOP10 celler, med tilføjelse af et F´ episom. F´ episom bærer et tetracyklinresistensgen og tillader isolering af enkeltstrenget DNA (ssDNA) fra vektorer, der har et fl-replikationsstartsted. Derudover er F´ episom bærer lac Iq-repressoren til inducerbar ekspression fra trc- , tac- og lac- promotorer ved anvendelse af IPTG.

TOP10F´ kompetente celler tilvejebringes med en transformationseffektivitet på> 1 x 10 ⁹ cfu/μ g supercoiled DNA og er ideelle til højeffektiv kloning og plasmidformering.

Som et afledt af TOP10 , TOP10F´ Kemisk kompetente E. coli -celler bærer mutationer i det methyleringsafhængige restriktionssystem ( mcr A, mcr BC og mrr ), hvilket giver dem mulighed for at klone både prokaryot og eukaryotisk genomisk DNA og give effektiv plasmidredning fra eukaryote genomer. TOP10F´ celler bærer også rec A1 og ende A1 mutationer, der øger insert stabilitet og forbedrer kvaliteten af plasmid DNA fremstillet fra minipreps.

One Shot TOP10F´ Kemisk kompetente E. coli - celler tilbyder:
• Transformationseffektiviteter af> 1 x 10 ⁹ cfu/μ g
• Stabil F´ episom, der tillader isolering af ssDNA og bærer lac Iq-repressor til inducerbar ekspression fra trc- , tac- og lac- promotorer
•hsd R til effektiv transformation af umethyleret DNA fra PCR-amplifikationer
•mcr A til effektiv transformation af methyleret DNA fra genomiske præparater
•lac Z ΔM15 til blå/hvid farvescreening af rekombinante kloner på plader indeholdende X-Gal eller Bluo-Gal
•ende A1 til renere DNA-præparater og bedre resultater i downstream-applikationer på grund af eliminering af uspecifik fordøjelse med endonuklease I
•rec A1 for reduceret forekomst af uspecifik rekombination i klonet DNA

Bemærk: IPTG-induktion er påkrævet til blå-hvid farvescreening.

Nemt at bruge One Shot-format
TOP10 F´ Kemisk kompetente E. coli -celler leveres i det praktiske enkeltreaktions One Shot-format. Enkeltrørs-engangsformatet tillader alle trin i transformationsprotokollen, op til plettering, at finde sted i samme rør, hvilket sparer tid og forhindrer kontaminering.

Genotype F {
´lac Iq, Tn 10(TetR)} mcr AΔ ( mrr - hsd RMS- mcr BC)φ 80 lac Z M15ΔΔlac X74 rec A1 ara D139Δ ( ara-leu )7697 gal U gal K rps L(StrR) end A1 nup G

Find de stammer og formater, der passer til dine behov
• DH-stammer er tilgængelige i kemisk kompetente og elektrokompetente celleformater.
• Til applikationer med høj kapacitet er der en række forskellige TOP10 stammer ind MultiShot formater.
• For ssDNA-produktion prøv stammer såsom TOP10F´ (Kat. Nr. C303003) eller elektrokompetent DH12S (Kat. Nr. 18312017).