Invitrogen™ En Shot™ INV110 Kemisk Kompetent E. coli

One Shot INV110 kemisk kompetente E. coli -celler er afledt af JM110-stammen og er specifikt designet til vækst og oprensning af plasmid-DNA, som vil blive fordøjet med dam- eller dcm -methyleringsfølsomme restriktionsenzymer. Dam- og dcm- manglen muliggør produktion af plasmid-DNA, der er umethyleret på GmATC- og CmC(A/T)GG-steder. INV110 Kemisk Kompetente celler kan opnå en transformationseffektivitet på> 1 x 10 ⁶ cfu/μ g kontrol-DNA.

INV110-stammen er en væsentlig forbedring i forhold til JM110-stammen. INV110-stammen er blevet konstrueret til at bære en ende -A1-mutation, som eliminerer den ikke-specifikke endonuklease I, til forbedret plasmid-DNA-præparation. Mutation i det methyleringsafhængige restriktionssystemΔ ( mcr C- mrr ) tillader transformation af genomisk DNA. Denne stamme har også genotypen lac ΔZ M15, hvilket giver mulighed for blå-hvid screening på plader, der indeholder enten X-Gal eller Bluo-Gal. INV110-stammen indeholder en F´ episom, der kan understøtte kloningsplasmider med et f1-lignende replikationsstartsted (phagemider) og tillader isolering af enkeltstrenget DNA (ssDNA). Derudover er F´ episom bærer lac Iq-repressoren til inducerbar ekspression fra trc- , tac- og lac- promotorer ved anvendelse af IPTG.

One Shot INV110 kemisk kompetent E. coli tilbud:
• Transformationseffektiviteter af> 1 x 10 ⁶ cfu/μ g
•dam- og dcm -mangel for at tillade restriktionsfordøjelse med dam- og dcm-følsomme restriktionsenzymer
• Stabil F´ episom, der tillader isolering af ssDNA og bærer lac Iq-repressor til inducerbar ekspression fra trc- , tac- og lac- promotorer
•Δ ( mcr C- mrr ) mutation, der reducerer spaltning af fremmed methyleret DNA og forbedrer transformation af genomisk DNA
•lac Z M15 Δtil blå-hvid farvescreening af rekombinante kloner
•ende A1 til renere DNA-præparater og bedre resultater i downstream-applikationer på grund af eliminering af uspecifik fordøjelse med endonuklease I
• Tn10 for at tillade valg af værtsstammen ved hjælp af tetracyclin

Bemærk: damdeletion resulterer i højere mutationshastighed, højere rekombinationsfrekvens og lavere levedygtighed på plader. Undgå at plukke kolonier, der er mærkbart større end resten af befolkningen (potentielle tilbagevendende). Vælg kolonier og isoler DNA'et inden for en dag efter transformation.

Praktisk og effektivt format
One Shot INV110 kemisk kompetente E. coli -celler leveres i det praktiske enkeltreaktions One Shot-format. Hvert rør indeholder nok celler til én transformation, hvilket reducerer både fryse-tø-cyklusser og omkostninger forbundet med ubrugte celler.

Genotype
´F [ tra D36 proABlac Iq lac ΔZ M15] rps L (StrR) thr leu end A thi -1 lac Y gal K gal T ara ton A tsx dam dcm sup E44Δ ( lac - proAB )Δ ( mcr C- mrr )102:: Tn 10(TetR)

Find den belastning og det format, der passer til dine behov
• Vi tilbyder andre stammer i kemisk kompetente og elektrokompetente celleformater for at opfylde dine specifikke behov.
• Strammer ind MultiShot formater til højkapacitetsapplikationer er tilgængelige.
• Alternative stammer til ssDNA-produktion er tilgængelige, såsom TOP10F´ (Kat. Nr. C303003) eller elektrokompetent DH12S (Kat. Nr. 18312017).
• Udforsk restriktionsenzymdetaljer for at finde methyleringsfølsomhed.