Invitrogen™ BL21 Star™ (DE3)pLys One Shot™ Kemisk kompetent E. coli

Et skud BL21 Star (DE3)pLysS Kemisk kompetente E. coli er celler designet til applikationer, der kræver ekspression på højt niveau af ikke-toksiske rekombinante proteiner fra vektorer med lavt eller højt kopiantal, såsom pRSET og pET. BL21 (DE3) E. coli -stammen er en af de mest populære værtsstammer til at producere rekombinante proteiner og er tilpasset til forskning og industrielle anvendelser (f.eks. første biofarmaceutiske rekombinant human insulin).

BL21(DE3) er et derivat af E. coli B-stammen, der ikke indeholder lon-proteasen og også er mangelfuld i den ydre membranprotease OmpT. Manglen på to nøgleproteaser reducerer nedbrydning af heterologe proteiner udtrykt i stammerne. Derudover gjorde flere andre stammeegenskaber dem særligt velegnede til proteinproduktion, nemlig hurtig vækst i minimalt medium, en lavere acetatproduktion, når de dyrkes i medier med højt glukoseindhold, og evnen til at nå høj celletæthed.

Denne stamme blev konstrueret til at bæreλ DE3-lysogen, der indeholder T7 RNA-polymerasegen under kontrol af lac UV5-promotoren. IPTG er påkrævet for at inducere ekspression af T7 RNA polymerase kaskadesystemet, som igen transskriberer T7 promotor reguleret målgen. pLysS CamR-plasmidet båret af BL21 Star (DE3) pLysS-stamme udtrykker T7-lysozym, en T7 RNA-polymerasehæmmer, der forhindrer utæt ekspression i ikke-inducerede celler. p15a-oprindelsen af pLysS gør dette plasmid kompatibelt med pUC- eller pBR322-afledte plasmider. Denne stamme tilbyder forbedret mRNA-stabilitet på grund af en mutation i RNaseE-genet ( rne 131), der reducerer niveauer af endogene RNaser og mRNA-nedbrydning, og derved øger mRNA-proteinets transkriptionsstabilitet. De BL21 Star (DE3) pLys-stamme har lavere basal ekspression af heterologe gener end BL21 Star (DE3) stamme. Andre tog som f.eks BL21-AI anbefales til toksisk proteinekspression. Et skud BL21 Star (DE3) pLysS Kemisk Kompetente celler har en transformationseffektivitet på> 1 x 10 ⁸ cfu/μ g plasmid DNA.

Et skud BL21 Star (DE3)pLysS Kemisk Kompetent E.coli tilbud:
• Transformationseffektivitet af> 1 x 10 ⁸ cfu/μ g plasmid DNA
• Ion- og OmpT-proteasemangel reducerer nedbrydning af rekombinant protein
• IPTG-inducerbar lacUV5-promotor kontrollerer ekspression af T7 RNA-polymerasen
•rne 131-mutation reducerer niveauer af endogene RNaser og mRNA-nedbrydning
• pLysS (CamR) plasmid til reduceret basal ekspression i ikke-inducerede celler
•hsd S-mutation muliggør effektiv transformation af umethyleret DNA
• Hurtig vækst i minimalt medium og evne til at nå høj

celletæthed Nemt at bruge One Shot-format
BL21 Star (DE3) pLysS Kemisk Kompetente E. coli -celler leveres i det praktiske enkeltreaktions One Shot-format. Enkeltrørs-engangsformatet tillader alle trin i transformationsprotokollen, op til plettering, at finde sted i det samme rør, hvilket hjælper med at spare tid og forhindre kontaminering.

Genotype F
^-omp T hsd SB (r _B^- , m _B^- ) gal dcm rne 131 (DE3) pLysS (CamR)

Find den belastning og det format, du har brug for
• Vi tilbyder andre E. coli -stammer til proteinekspression.
• Overvej for ekspression af giftige proteiner BL21-AI One Shot kemisk kompetent E. coli (kat. nr. C607003).
• BL21 Star (DE3) og andre stammer er tilgængelige i MultiShot formater til applikationer med høj kapacitet.
• Vi tilbyder en række forskellige systemer til ekspression af rekombinante proteiner i E. coli , Champion pET ekspressionssystemet giver det højeste niveau af proteinproduktion tilgængeligt i ethvert ekspressionssystem.