Invitrogen™ En Shot™ BL21(DE3)pLysS Kemisk Kompetent E. coli

One Shot BL21(DE3)pLysS kemisk kompetente E. coli -celler er ideelle til brug med bakteriofag T7-promotor-baserede ekspressionssystemer såsom pRSET og pET. pLysS-plasmidet båret af BL21(DE3) pLysS-stammen producerer T7-lysozym, en inhibitor af T7 RNA-polymerase, for at reducere basalniveauekspression af genet af interesse. pLysS giver resistens over for chloramphenicol (CamR) og indeholder p15A-originet. Denne oprindelse gør det muligt for pLysS at være kompatibel med plasmider, der indeholder ColE1- eller pMB1-oprindelsen (dvs. pUC- eller pBR322-afledte plasmider). Rekombinante proteiner, der er ikke-toksiske for E. coli, udtrykkes generelt i højere niveauer i BL21(DE3)-celler sammenlignet med BL21(DE3) pLysS-stammen med strammere ekspressionskontrol. BL21(DE3)pLysS anbefales til brug ved ekspression af toksiske gener.

BL21 (DE3) E. coli -stammen er en af de mest populære værtsstammer til at producere rekombinante proteiner. Denne stamme var blevet konstrueret til at bæreλ DE3-lysogen, der indeholder T7 RNA-polymerasegen under kontrol af lac UV5-promotoren. IPTG er påkrævet for at inducere ekspression af T7 RNA polymerase kaskadesystemet, som igen transskriberer T7 promotor reguleret målgen.

BL21(DE3) er et derivat fra E. coli B-stammen, der ikke indeholder ionproteasen og også er mangelfuld i den ydre membranprotease OmpT. Manglen på to nøgleproteaser reducerer nedbrydning af heterologe proteiner udtrykt i stammerne. Derudover gør flere andre stammeegenskaber dem særligt velegnede til proteinproduktion, nemlig hurtig vækst i minimalt medium, en lavere acetatproduktion, når de dyrkes i medier med højt glucoseindhold, og en evne til at nå høj celletæthed. One Shot BL21(DE3)pLysS kemisk kompetente E. coli -celler kan opnå transformationseffektivitet på> 1 x 10 ⁸ cfu/μ g kontrol-DNA.

One Shot BL21(DE3)pLysS kemisk kompetente E. coli - celler tilbyder:
• Transformationseffektivitet af> 1 x 10 ⁸ cfu/μ g kontrol plasmid DNA
• Ion- og OmpT-proteasemangel, der reducerer nedbrydning af rekombinant protein
• IPTG-inducerbar lac UV5-promotor, der kontrollerer ekspression af T7 RNA-polymerasen
• pLysS (CamR) plasmid til reduceret basal ekspression i ikke-inducerede celler
•hsd S-mutation, der muliggør effektiv transformation af umethyleret DNA
• Hurtig vækst i minimalt medium og evne til at nå

høj celletæthed Brugervenligt One Shot-format
BL21(DE3)pLysS Kemisk kompetente E. coli -celler leveres i det praktiske enkeltreaktions One Shot-format. Enkeltrørs-engangsformatet tillader alle trin i transformationsprotokollen, op til plettering, at finde sted i det samme rør, hvilket hjælper med at spare tid og forhindre kontaminering.

Genotype F
^– omp T hsd SB (r _B , m –_B ) –gal dcm (DE3) pLysS(CamR)

Find den belastning og det format, du har brug for
• Vi tilbyder andre E. coli -stammer til proteinekspression.
• For ekspression af toksiske proteiner, overvej BL21 AI One Shot kemisk kompetent E. coli (kat. nr. C607003).
• BL21 Star (DE3) og andre stammer er tilgængelige i MultiShot formater til applikationer med høj kapacitet.
• Vi tilbyder en række forskellige systemer til ekspression af rekombinante proteiner i E. coli. Champion pET-ekspressionssystemet giver det højeste niveau af proteinproduktion, der er tilgængeligt i ethvert ekspressionssystem.