Invitrogen™ One Shot™ BL21(DE3) kemisk kompetente E. coli

One Shot BL21(DE3) kemisk kompetente E. coli-celler er ideelle til brug med bakteriofag T7-promotor-baserede ekspressionssystemer såsom pRSET og pET. Denne stamme var blevet konstrueret til at bære λDE3-lysogen, der indeholder T7 RNA-polymerasegen under kontrol af lacUV5-promotoren. Rekombinante proteiner, der er ikke-toksiske for E. coli, udtrykkes generelt i højere niveauer i BL21(DE3)-celler sammenlignet med andre stammer med strammere ekspressionskontrol.

BL21(DE3) E. coli-stammen er en af de mest populære værtsstammer til at producere rekombinante proteiner og tilpasset til forskning eller industrielle applikationer. Det er et derivat af E. coli B-stammen, der ikke indeholder lon-proteasen og er også mangelfuld i den ydre membranprotease OmpT. Manglen på to nøgleproteaser reducerer nedbrydning af heterologe proteiner udtrykt i stammerne. Derudover gør flere andre stammeegenskaber dem særligt velegnede til proteinproduktion, nemlig hurtig vækst i minimalt medie, en lavere acetatproduktion, når de dyrkes i medier med højt glucoseindhold, og evnen til at nå høj celletæthed. One Shot BL21(DE3) kemisk kompetente E. coli-celler kan opnå transformationseffektivitet på >1 x 10 ⁸ cfu/μg kontrol-DNA.

Bemærkninger

• De basale ekspressionsniveauer af heterologe gener er signifikant højere i BL21(DE3), derfor anbefales stammer såsom BL21 AI til toksisk proteinekspression.
• IPTG er påkrævet for at inducere ekspression af T7 RNA polymerase kaskadesystemet, som igen transskriberer T7 promotor-reguleret målgen.

One Shot BL21(DE3) kemisk kompetent E. coli tilbyder:

• Transformationseffektivitet på> 1 x 10 ⁸ cfu/μ g kontrolplasmid-DNA
• Ion- og OmpT-proteasemangel reducerer nedbrydning af rekombinant protein
• IPTG-inducerbar lacUV5-promotor kontrollerer ekspression af T7 RNA-polymerasen
• hsd S-mutation muliggør effektiv transformation af umethyleret DNA
• Hurtig vækst i minimalt medie og evne til at nå høj celletæthed

Brugervenligt One Shot-format
BL21(DE3) Kemisk kompetente E. coli-celler leveres i det praktiske, enkeltreaktions One Shot-format. Formatet med et enkelt rør til engangsbrug gør, at alle trin i transformationsprotokollen indtil udpladning kan foregå i det samme rør, hvilket hjælper med at spare tid og forhindre kontaminering.

Genotype:
F–ompT hsdSB (rB–, mB–) gal dcm (DE3)

Find den stamme og det format, du har brug for

• Vi tilbyder andre E. coli-stammer til proteinekspression. Overvej BL21-AI™ One Shot™ kemisk kompetent E. coli (kat. nr. C607003) til ekspression af toksiske proteiner.
• BL21 Star (DE3) og andre stammer er tilgængelige i MultiShot-formater til applikationer med høj kapacitet.
• Vi tilbyder en række forskellige systemer til ekspression af rekombinante proteiner i E. coli.Champion pET-ekspressionssystemet giver det højeste niveau af proteinproduktion, der er tilgængeligt i ethvert ekspressionssystem.