Få mere at vide
Invitrogen™ GeneRacer™ Kit med SuperScript™ III RT og TOPO TA Cloning™ Kit til sekvensering
Beskrivelse
De GeneRacer Kit tilvejebringer en metode til at opnå fuldlængde 5'- og 3'-ender af cDNA under anvendelse af kendt cDNA-sekvens fra udtrykte sekvensmærker (EST'er), subtraheret cDNA, differentiel visning eller biblioteksscreening. RACE PCR-produkter kan hurtigt og nemt klones ved hjælp af enten Zero Blunt TOPO PCR-kloningskit til sekventering (stumpende PCR-produkter) eller TOPO TA Cloning til Sequencing Kit (PCR-produkter med 3' A-udhæng). Ved at bruge de tilvejebragte protokoller kan cDNA-enderne af sjældne (30 kopier/celle) og lange (9 kb) transkripter amplificeres og sekventeres startende fra 1 μg totalt RNA.
- Generer cDNA fra transkripter med en længde på mindst 10 kb
- Få fuldlængde 5'-enden af sjældne transkriptioner med færre end 30 kopier pr. celle
- Klon 5'- og 3'-ender i fuld længde for at konstruere komplet cDNA-sekvens
Kloning, PCR og realtids-PCR, omvendt transkription, cDNA-biblioteker og bibliotekskonstruktion
Ordreinfo
Forsendelsestilstand: Tøris
Tekniske data
Tekniske data
| Bakterie- eller gærstamme | TOP10 |
| Kloningsmetode | TOPO TA |
| Indhold og opbevaring | Gem hvert modul som angivet: GeneRacer™ Modul (-°20 C): • 2x 1,5 ml sterilt vand • 24μ l RNaseOut™ • 6μ l hver kalve intestinal fosfatase (CIP), CIP buffer, tobakssyre pyrophosphatase (TAP), 10X TAP buffer, T4 RNA Ligase, 10X T4 RNA-ligasebuffer og 10 mM ATP • 6x 250 ng GeneRacer™ RNA Oligo • 2x 1 ml Phenol/Chloroform • 36μ l Muslingeglykogen • 200μ l Natriumacetat (3 M) • 225μ l hver GeneRacer™ 5′ Primer, 5′ Nested Primer, 3′ Primer og 3′ Indlejret Primer • 20μ l Kontrol HeLa Total RNA (500 ng/μ l) • 15μ l hver kontrolprimer A og kontrolprimer B.1 SuperScript™ III RT-modul (-20 °C) • 6μ l SuperScript™ III Omvendt Transcriptase (200 U/μ l) • 24μ l 5X First Strand Buffer • 15μ l DTT (0,1 M) • 6μ l RNaseH (2 U/μ l) • 6μ l Tilfældige primere (100 ng/μ l) • 6μ l GeneRacer™ Oligo dT Primer (900 ng/μ l) • 6μ l dNTP-mix (10 mM hver) 10 S.N.A.P.™ Kolonner (stuetemperatur) TOPO TA Cloning™ Sæt til sekvensering (-20 °C) • Tilstrækkelige reagenser og en Shot™ TOP10 Kemisk kompetent E. coli (opbevares ved -80 °C) til at klone 10 GeneRacer™ PCR-produkter; GeneRacer Modul (-°20 C), SuperScript III RT-modul (-°20 C), Kompetent E. coli (opbevares ved -°80 C), S.N.A.P. Kolonner (stuetemperatur), TOPO TA Cloning Sæt til sekvensering (-20 °C) |
| Format | Sæt |
| Til brug med (applikation) | Revers transkription |
| Inkluderer | GeneRacer Modul: 2 x 1,5 ml sterilt vand, μ24 L RNaseOut, μ6 L hver kalvetarm-phosphatase (CIP), CIP-buffer, tobakssyrepyrophosphatase (TAP), 10X TAP-buffer, T4 RNA Ligase, 10X T4 RNA-ligasebuffer og 10 mM ATP , 6 x 250 ng GeneRacer RNA Oligo , 2 x 1 ml phenol/chloroform, μ36 l muslingeglykogen, 200 μl natriumacetat (3M ), 225 μl hver GeneRacer 5' Primer, 5' Nested Primer, 3' Primer og 3' Nested Primer, 20 μL kontrol HeLa Total RNA (500ng/μ L), μ15 L hver kontrolprimer A og kontrolprimer B.1; SuperScript III RT-modul: 6 μL SuperScript III omvendt Transcriptase (200U/μ L), 24 μL 5X First Strand Buffer, 15 μL DTT (0,1 M), 6 μL RNaseH (2U/μ L), 6 μL tilfældige primere (100ng/μ L), 6 μL GeneRacer Oligo dT Primer (900ng/μ L), 6 μL dNTP-blanding (10 mM hver), 10 S.N.A.P. kolonner, TOPO TA Cloning Kit til sekventering (-20 °C), Tilstrækkelige reagenser og One Shot TOP10 Kemisk kompetent E. coli |
| Produktlinje | Generacer , SuperScript , TA Cloning , TOPO |
| Produkttype | Kloningssæt |
| Mængde | 1 sæt |
| Vektor | pCR4-TOPO TA |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.