Få mere at vide
Invitrogen™ BLOCK-iT™ U6 RNAi Entry Vector Kit
Beskrivelse
Indeholder
De BLOCK-iT™ U6 Entry Vector Kit indeholder to kasser. Kloningsboksen indeholder fire rør med lineariseret vektor ved 5 ng/rør, nok til at fuldføre 5 kloningsreaktioner pr. rør. Også inkluderet er μ250 L 10X annealing μbuffer, 20 L T4 DNA-μligase, 80 L 5X DNA-ligasebuffer, 1,4 ng lac Z-kontrololigo, μ10 L lyofiliseret lac Z-kontrolplasmid, 1,5 ml DNase/RNase-frit vand og μ2 g hver fremadgående og omvendt sekventeringsprimer.
En nem kloningsproces placerer en ca. 50-bp oligonukleotid DNA umiddelbart efter en U6 pol III type promotor. Ekspression af denne RNAi-kassette danner et shRNA-molekyle i cellen, der vil blive behandlet og fungere som kort interfererende RNA (siRNA), der vil generere RNAi-effekten.
Levering af U6 RNAi-kassetten Når kloningen er fuldført,
er U6 Entry Vector klar til at blive brugt med det samme i forbigående transfektioner ved hjælp af et reagens som f.eks. Lipofectamine™ 2000. Dette gør dette system ideelt til indledende shRNA-screeninger i mange pattedyrcelletyper. Som et alternativ i svære at transficere eller ikke-delende celletyper, eller til at levere til dyremodelsystemer, kan RNAi-kassetten nemt rekombineres til en BLOCK-iT Viral RNAi vektor. For stabil shRNA lentiviral levering og ekspression skal du rekombinere BLOCK-iT U6 Entry Vector med pLenti6/BLOCK-iT RNAi vektor. For forbigående levering til udfordrende celletyper ved hjælp af adenoviral transduktion, rekombinér med pAd/BLOCK-iT RNAi vektor. Repræsenterer en foretrukken teknik til at analysere gennedregulering.
Kloning, Gateway-kloning, RNAi, RNAi, epigenetik og ikke-kodende RNA-forskning, vektorbaseret RNAi
Tekniske data
Tekniske data
| Produkttype | RNAi Entry Vector Kit |
| Indhold og opbevaring | De BLOCK-iT™ U6 Entry Vector Kit indeholder to kasser. Kloningsboksen indeholder fire rør med lineariseret vektor ved 5 ng/rør, nok til at fuldføre 5 kloningsreaktioner pr. rør. Der medfølger også 250μ l 10X annealing buffer, 20μ l T4 DNA-ligase, 80μ l 5X DNA-ligasebuffer, 1,4 ng lac Z kontrololigo, 10μ l lyofiliseret lac Z kontrolplasmid, 1,5 ml DNase/RNase-frit vand og 2μ g hver af frem- og omvendt sekventeringsprimer. Opbevar vektorerne, bufferne, kontrololigo og plasmid, vand og sekventeringsprimere ved -20 °C. Den ene Shot™ æsken indeholder transformationsreagenser inklusive enogtyve 50-μ l alikvoter af One Shot™ TOP10 Kemisk kompetent E. coli , SOC medium og et pUC19 supercoiled kontrolplasmid. Opbevares ved -80 °C. Alle reagenser er garanteret stabile i 6 måneder, når de opbevares korrekt. |
| Kloningsmetode | Gateway™ |
| Konstitutivt eller inducerbart system | Konstitutiv |
| Leveringstype | Transfektion |
| RNAi type | shRNA |
| Vektor | BLOCK-iT RNAi vektorer |
| Promotor | U6 |
| Format | Sæt |
| Produktlinje | BLOCK-iT |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.