Få mere at vide
Invitrogen™ BLOCK-iT™ U6 RNAi Entry Vector Kit
Beskrivelse
Indeholder
De BLOCK-iT™ U6 Entry Vector Kit indeholder to kasser. Kloningsboksen indeholder fire rør med lineariseret vektor ved 5 ng/rør, nok til at fuldføre 5 kloningsreaktioner pr. rør. Også inkluderet er μ250 L 10X annealing μbuffer, 20 L T4 DNA-μligase, 80 L 5X DNA-ligasebuffer, 1,4 ng lac Z-kontrololigo, μ10 L lyofiliseret lac Z-kontrolplasmid, 1,5 ml DNase/RNase-frit vand og μ2 g hver fremadgående og omvendt sekventeringsprimer.
En nem kloningsproces placerer en ca. 50-bp oligonukleotid DNA umiddelbart efter en U6 pol III type promotor. Ekspression af denne RNAi-kassette danner et shRNA-molekyle i cellen, der vil blive behandlet og fungere som kort interfererende RNA (siRNA), der vil generere RNAi-effekten.
Levering af U6 RNAi-kassetten Når kloningen er fuldført,
er U6 Entry Vector klar til at blive brugt med det samme i forbigående transfektioner ved hjælp af et reagens som f.eks. Lipofectamine™ 2000. Dette gør dette system ideelt til indledende shRNA-screeninger i mange pattedyrcelletyper. Som et alternativ i svære at transficere eller ikke-delende celletyper, eller til at levere til dyremodelsystemer, kan RNAi-kassetten nemt rekombineres til en BLOCK-iT Viral RNAi vektor. For stabil shRNA lentiviral levering og ekspression skal du rekombinere BLOCK-iT U6 Entry Vector med pLenti6/BLOCK-iT RNAi vektor. For forbigående levering til udfordrende celletyper ved hjælp af adenoviral transduktion, rekombinér med pAd/BLOCK-iT RNAi vektor. Repræsenterer en foretrukken teknik til at analysere gennedregulering.
Kloning, Gateway-kloning, RNAi, RNAi, epigenetik og ikke-kodende RNA-forskning, vektorbaseret RNAi
Tekniske data
Tekniske data
| Produkttype | RNAi Entry Vector Kit |
| Indhold og opbevaring | De BLOCK-iT™ U6 Entry Vector Kit indeholder to kasser. Kloningsboksen indeholder fire rør med lineariseret vektor ved 5 ng/rør, nok til at fuldføre 5 kloningsreaktioner pr. rør. Der medfølger også 250μ l 10X annealing buffer, 20μ l T4 DNA-ligase, 80μ l 5X DNA-ligasebuffer, 1,4 ng lac Z kontrololigo, 10μ l lyofiliseret lac Z kontrolplasmid, 1,5 ml DNase/RNase-frit vand og 2μ g hver af frem- og omvendt sekventeringsprimer. Opbevar vektorerne, bufferne, kontrololigo og plasmid, vand og sekventeringsprimere ved -20 °C. Den ene Shot™ æsken indeholder transformationsreagenser inklusive enogtyve 50-μ l alikvoter af One Shot™ TOP10 Kemisk kompetent E. coli , SOC medium og et pUC19 supercoiled kontrolplasmid. Opbevares ved -80 °C. Alle reagenser er garanteret stabile i 6 måneder, når de opbevares korrekt. |
| Kloningsmetode | Gateway™ |
| Konstitutivt eller inducerbart system | Konstitutiv |
| Leveringstype | Transfektion |
| RNAi type | shRNA |
| Vektor | BLOCK-iT RNAi vektorer |
| Promotor | U6 |
| Format | Sæt |
| Produktlinje | BLOCK-iT |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.