missing translation for 'onlineSavingsMsg'
Få mere at vide
  1. Home
  2. Products
  3. Proteinanalysereagenser
  4. Gene Reporter Systemer
  5. 10206432

Invitrogen™ BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP

Artikelnummer. 10206432
Skift visning
Klik for at se tilgængelige muligheder
Mængde:
20 reaktioner
Pakningsstørrelse:
Hver
1 product options available for selection
Product selection table with 1 available options. Use arrow keys to navigate and Enter or Space to select.
Artikelnummer. Mængde unitSize
10206432 20 reaktioner Hver
Use arrow keys to navigate between rows. Press Enter or Space to select a product option. 1 options available.
1 options
Denne vare kan ikke returneres. Se returpolicy
Artikelnummer. 10206432 Leverandør Invitrogen™ Leverandørnr. K493600

Venligst for at købe denne vare. Brug for en webkonto? Register dig hos os i dag!

Denne vare kan ikke returneres. Se returpolicy

Beskrivelse

Indeholder

BLOCK-iT ™Pol II miR RNAi Expression Vector Kit indeholder to æsker. Kloningsboksen indeholder lineariseret pcDNA ™6,2-GW/miR, 10X annealing-buffer, T4 DNA-ligase, 5X DNA-ligeringsbuffer, lacZ-kontrololigo, lacZ-kontrolplasmid, negativ kontrolplasmid, DNase/RNase-frit vand og fremadgående og omvendte sekventeringsprimere.

Kombinerer fordelene ved traditionelle RNAi-vektorer (stabil ekspression og evnen til at bruge viral levering) med muligheder for vævsspecifik ekspression og multiple target knockdown fra det samme transkript

pcDNA ™6.2-GW/EmGFP-miR vektoren inkluderet i BLOCK-iT Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP er designet til at udtrykke kunstige miRNA'er, som er konstrueret til at have 100 % homologi med din målsekvens og vil resultere i målspaltning. Denne vektor inkluderer flankerende og loop-sekvenser fra et endogent miRNA, som styrer udskæringen af det konstruerede miRNA fra et længere Pol II-transkript (præ-miRNA). Bruger Invitrogen's prisvindende BLOCK-iT RNAi Designer, over 70% af konstruktionerne producerer mere end 70% knockdown. Pol II-ekspression af konstruerede miRNA'er muliggør:

  • Stærk ekspression fra CMV umiddelbart tidlige promotor, med mulighed for at bruge vævsspecifikke eller andre regulerede promotorer via MultiSite Gateway™ rekombination
  • Co-cistronisk ekspression af en Emerald GFP (EmGFP) reporter i pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR vektoren, hvilket resulterer i meget stærk korrelation af EmGFP ekspression med knockdown aktiviteten af dit miRNA
  • Kompatibilitet med mange af Invitrogen's Gateway destination (DEST) vektorer til genekspression; herunder lentivirale vektorer til stabil transduktion af delende, ikke-delende og primære celletyper, Flp-In™ system til single-site kromosomal integration og alternative reporter-fusionskonstruktioner
  • Ekspression af mere end ét manipuleret miRNA på det samme transkript, hvilket muliggør knockdown af flere gener samtidigt og generering af syntetiske fænotyper
Hvordan det virker
For høje niveauer af ekspression af din miR RNAi-sekvens inkluderer pcDNA6.2-GW/miR-vektoren CMV-promotoren. Du skal blot indtaste et RefSeq-adgangsnummer eller en nukleotidsekvens i den gratis online BLOCK-iT RNAi Designer og softwaren vil designe optimerede miRNA'er, der har 100% homologi med det interesserede mål. Klon miRNA'et ind i vektoren ved hjælp af en hurtig ligeringsprotokol og transfekter til øjeblikkelig miRNA-ekspression. Udtrykt miRNA behandles af det endogene cellulære maskineri i kernen (inklusive Drosha) og transporteres derefter ind i cytoplasmaet, hvor det viderebearbejdes af Dicer. Det fuldt forarbejdede miRNA inkorporeres derefter i RISC, hvor det fungerer som et siRNA og resulterer i spaltning af mRNA-målet.
For en række forskellige ekspressionsmuligheder kan miRNA-kassetten, som indeholder EmGFP, miR-flankerende regioner og et miRNA, der er homologt med målet af interesse, let flyttes ind i en række DEST-vektorer. Dette sker gennem Gateway-rekombinationsreaktioner, hvor miRNA-kassetten overføres til en pDONR™ vektor (BP-reaktion) og derefter ind i en DEST-vektor (LR-reaktion) efter eget valg.

Kloning, Gateway-kloning, RNAi, RNAi, epigenetik og ikke-kodende RNA-forskning, vektorbaseret RNAi

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Tekniske data

Produkttype RNAi Expression Vector Kit
Gene GFP (EmGFP)
Indhold og opbevaring BLOCK-iT ™Pol II miR RNAi Expression Vector Kit indeholder to æsker. Kloningsboksen indeholder lineariseret pcDNA ™6.2-GW/EmGFP-miR, 10X annealing buffer, T4 DNA-ligase, 5X DNA-ligeringsbuffer, lacZ-kontrololigo, lacZ-kontrolplasmid, negativ kontrolplasmid, DNase/RNase-frit vand og fremadgående og omvendte sekventeringsprimere. Opbevar vektorerne, bufferne, kontrololigo og plasmider, vand og sekventeringsprimere ved -20 °C. Den ene Shot™ æsken indeholder transformationsreagenser inklusive enogtyve 50-μ l alikvoter af One Shot™ TOP10 Kemisk kompetent E. coli, SOC medium og et pUC19 supercoiled kontrolplasmid. Opbevar disse transformationsreagenser -80 °C. Alle reagenser er garanteret stabile i 6 måneder, når de opbevares korrekt.
Kloningsmetode Gateway™
Konstitutivt eller inducerbart system Konstitutiv
Leveringstype Transfektion
RNAi type miRNA
Udvælgelsesagent (eukaryot) Blasticidin
Vektor BLOCK-iT RNAi vektorer
Promotor CMV
Format Sæt
Produktlinje BLOCK-iT , Gateway
Mængde 20 reaktioner
Vis mere Vis mindre

Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.

Produkttitel
Vælg et problem

Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.