Invitrogen™ BLOCK-iT™ Lentiviral RNAi Gateway™ Vektorsæt

En ny kloningsproces placerer en ca. 50-bp DNA-oligonukleotid umiddelbart efter en U6 pol III-promotor ind i BLOCK-iT U6 indgangsvektor. Oligonukleotidet er designet til at udtrykke RNA, der danner en stemLoop-struktur, der indeholder sense- og antisense-regionerne af dit målgen af interesse. Dette shRNA rekombineres derefter i pLenti6/BLOCK-iT-DEST vektoren. Efter viral produktion og transduktion bliver shRNA'et drevet af U6-promotoren stabilt integreret som en RNAi-kassette. Det genererede shRNA undgår værtens forsvarsmekanisme og vil være effektivt til at producere RNAi-genets knockdown-respons. Ved hjælp af BLOCK-iT Lentiviralt RNAi-ekspressionssystem, langtidsanalyse af genblokering i både delende og ikke-delende pattedyrcelletyper og dyremodeller kan opnås.

De BLOCK-iT RNAi U6 Entry Vector Kit tillader strømlinet kloning af shRNA-målsekvenser til test i forbigående eksperimenter. Udvalgte RNAi-ekspressionskassetter rekombineres hurtigt og effektivt fra BLOCK-iT RNAi U6 indgangsvektor i pLenti6/BLOCK-iT-DEST vektoren via en standard Gateway LR rekombinationsreaktion.

• att R-steder til effektiv rekombination med den att L-flankerede U6 Gateway™ indgangsvektor indeholdende RNAi-kassetten
• Alle de nødvendige komponenter til effektiv lentiviral pakning og levering af shRNA'et af interesse
• Blasticidin selektionsmarkør til hurtig, effektiv selektion af stabile cellelinjer, der udtrykker shRNA

Kloning, Gateway-kloning, Lentiviral shRNA og miRNA, RNAi, RNAi, epigenetik og ikke-kodende RNA-forskning, virusbaseret RNAi