Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly HiFi Cloning Kit, elektrokompetente celler

De GeneArt Gibson Assembly HiFi Cloning Kit muliggør DNA-samling og kloning via en teknik, der tillader flere overlappende DNA-fragmenter at blive sømløst forbundet i en et-trins, 15 –60 minutters isotermisk reaktion. DNA-fragmenter af forskellig længde samles ensartet under anvendelse af komplementære overlapninger mellem fragmenter. Den iboende fleksibilitet af denne fremgangsmåde er velegnet til små og store DNA-konstruktioner og inkluderer både enkelte og multiple inserts. De resulterende produkter kan bruges til en række forskellige downstream-applikationer, herunder transformation, PCR og rullende cirkelamplifikation (RCA ). De GeneArt Gibson Assembly HiFi Cloning Kit, elektrokompetente celler, er et komplet sæt, der inkluderer mastermix, positiv kontrol, vand og ElectroMAX DH10B elektrokompetent E. coli.

Funktioner af GeneArt Gibson Assembly HiFi Cloning Kit inkluderer:

• Saml og klon enkelt —og sømløst op til seks DNA-fragmenter i en enkelt reaktion
• Effektiv —high fidelity giver mere korrekte kloner end andre metoder
• Fleksible —designretningslinjer tillader montering i enhver vektor efter eget valg
• Praktisk —tilgængelig som master mix kits og kloning kits komplet med kemiske eller elektrokompetente celler
• Har tillid til —over 4000 citater i den videnskabelige litteratur, der fremhæver stor succes

Sømløs samling af flere fragmenter

GeneArt Gibson Assembly HiFi-kloning er en enkel et-trins proces, hvor op til seks fragmenter kombineres i en proprietær enzymatisk blanding for at samle DNA-fragmenter med delt terminal endehomologi uden at efterlade nogen ekstra sekvenser eller ar (sømløs). Efter en –15 60 minutters inkubation transformeres en del af samlingsreaktionen til kemisk kompetente eller elektrokompetente celler, hvilket giver kloner, der er klar til analyse næste dag. Den påkrævede 20- til 40-basepar-endehomologi er designet ind i de novo-fragmentet til syntese eller kan let konstrueres ved PCR-amplifikation med tilpassede DNA-oligoer. Denne specielle enzymblanding skaber en sømløs og kovalent bundet DNA-konstruktion, der giver høj effektivitet.

Robust metode for maksimal effektivitet

På grund af det kovalent bundne slutprodukt, GeneArt Gibson Assembly HiFi-metoden tillader brugen af kemisk kompetente celler eller elektrokompetente celler til den højeste transformationseffektivitet, hvilket forbedrer succesen med at finde den rigtige klon, især til mere udfordrende konstruktioner. Der er intet behov for restriktionsenzymer, ligering eller rekombinationssteder, og metoden giver en perfekt sømløs konstruktion uden uønskede ekstra baser.

Giver stor alsidighed

De GeneArt Gibson Assembly HiFi-metoden giver alsidighed, kan strømline mange teknikker gennem hurtig kombination, tilføjelse, sletning eller udveksling af DNA-segmenter og eliminerer behovet for at subklone, hvilket sparer tid og kræfter i klonings-workflowet.