Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly EX Kloningssæt, elektrokompetente celler

De GeneArt Gibson Assembly EX Kloningskit muliggør DNA-samling via en teknik, der gør det muligt at forbinde op til 15 overlappende DNA-fragmenter sømløst i en enkelt-rørs, to-trins optimeret reaktion. DNA-fragmenter af forskellig længde samles ensartet under anvendelse af komplementære overlapninger mellem fragmenter. Den iboende fleksibilitet og succes af denne tilgang er velegnet til små og store DNA-konstruktioner, omfatter både enkelte og multiple inserts og er blevet brugt til at bygge hele genomer. De resulterende produkter kan bruges til en række forskellige downstream-applikationer, herunder transformation, PCR og rullende cirkelamplifikation (RCA ). De GeneArt Gibson Assembly EX Kloningskit, elektrokompetente celler, er et komplet sæt, der inkluderer mastermix, positiv kontrol, vand og ElectroMAX DH10B elektrokompetent E. coli.

Funktioner af GeneArt Gibson Assembly EX Kloningssæt inkluderer:

• Saml og klon enkelt —og problemfrit op til 15 DNA-fragmenter i en enkelt reaktion
• Effektiv —robust effektivitet giver vellykkede kloner til både simple og udfordrende konstruktioner
• Fleksible —designretningslinjer tillader montering i enhver vektor efter eget valg
• Praktisk —tilgængelig som master mix kits og kloning kits komplet med kemiske eller elektrokompetente celler
• Har tillid til —over 4000 citater i den videnskabelige litteratur, der fremhæver stor succes

Sømløs samling af op til 15 fragmenter

GeneArt Gibson Assembly EX kloning er en robust, enkelt-rørs, to-trins proces, hvor op til 15 inserts og vektor kombineres i en proprietær enzymatisk blanding for at samle DNA-fragmenter med delt terminal endehomologi uden at efterlade nogen ekstra sekvenser eller ar (sømløs). Efter at denne dobbelt optimerede reaktion er afsluttet, transformeres en del af samlingsreaktionen til kemisk kompetente eller elektrokompetente celler, hvilket giver kloner klar til analyse næste dag. Den påkrævede 20- til 40-basepar-endehomologi er designet ind i de novo-fragmentet til syntese eller kan let konstrueres ved PCR-amplifikation med tilpassede DNA-oligoer. Denne specielle enzymblanding skaber en sømløs og kovalent bundet DNA-konstruktion, der giver høj effektivitet.

Robust metode til maksimal effektivitet

På grund af det kovalent bundne slutprodukt, GeneArt Gibson Assembly EX metode tillader brugen af kemisk kompetente celler eller elektrokompetente celler for den højeste transformationseffektivitet, især vigtig for udfordrende konstruktioner. Der er intet behov for restriktionsenzymer, ligering eller rekombinationssteder, og metoden giver en perfekt sømløs konstruktion uden uønskede ekstra baser.

Giver stor alsidighed

De GeneArt Gibson Assembly EX metode giver alsidighed, kan strømline mange teknikker gennem hurtig kombination, tilføjelse, sletning eller udveksling af DNA-segmenter og eliminerer behovet for at subklone, hvilket sparer tid og kræfter i kloningsarbejdsgangen.