Molecular Probes™ FluxOR™ Kaliumionkanalanalyse

• K ⁺ -kanalspecifik —måler ionflux i både spændings- og ligand-gatede kaliumkanaler
• Hurtige —skærme i højhastighedstilstand med reproducerbare resultater og fremragende S/N uden quenching farvestof
• Farmakologisk relevante —kendte blokkere viser dosisafhængig hæmning i et stort signalvindue

De FluxOR™ Kaliumionkanalassay er et optisk baseret, homogent assay til high throughput screening (HTS) målinger af kaliumionkanal og transportøraktiviteter. Det homogene assay er baseret på permeabiliteten af kaliumkanaler til thallium I. Når kaliumkanaler åbnes af en stimulus, detekteres thalliumtilstrømning fra det eksterne medium med et meget følsomt indikatorfarvestof. Det fluorogene signal afspejler kvantitativt aktiviteten af ionkanaler og transportere, der er permeant for thallium, herunder hERG, Kir2.1 og andre farmakologisk vigtige kaliumkanaler. Fluorescens rapporteret i FluxOR™ systemet bliver således en surrogatindikator for aktivitet for enhver ionkanal eller transportør, der er permeabel for thallium.

De FluxOR™ Kaliumionkanalanalyse muliggør hurtig og robust high-throughput screening (HTS) af kaliumkanalmål i en ny ligevægtsmåling, hvilket reproducerbart giver IC _50- værdier, der er forudsigelige for blokering eller modulering i platforme med lavere gennemstrømning. De FluxOR™ farvestof er følsomt nok til, at lave mM-niveauer af ekstracellulært thallium giver store signaler i high-throughput-tilstand. For de fleste applikationer, FluxOR™ farvestof er opløst i fysiologisk HBSS-buffer til indlæsning i celler, assisteret af vores proprietære Powerload™ formulering (Katalognummer P10020).

De FluxOR™ Kaliumionkanalanalyse giver en koncentreret thalliumopløsning og alle nødvendige buffere, hvilket muliggør maksimal målfleksibilitet og nem betjening i et homogent format, der er blevet demonstreret til brug med celler, der stabilt udtrykker hERG, såvel som vores BacMam-hERG leverings- og ekspressionsreagens (katalognummer B10019 og B10033). Valgfrit til brug med dette kit er hERG-kaliumkanal-cDNA'et konstrueret ’i Invitrogens BacMam-leverings- og ekspressionssystem. Kombinationen af et lyst proprietært fluorescerende kaliumsensorfarvestof og hERG-kaliumkanalgenet leveret af BacMam giver fremragende assaydesignfleksibilitet og overlegen følsomhed ved påvisning af kaliumkanalaktivitet i biologisk relevante systemer under fysiologiske forhold uden behov for quenchere.