Invitrogen™ Fluorescerende proteinmærkesæt

• Fluorescerende mærke op til 1 mg protein pr. reaktion (tre reaktioner pr. sæt)
• Mærk –0,5 3 mg pr reaktion med DSB-X Biotinproteinmærkningssæt (fem reaktioner pr. sæt)
• Mærkede proteiner klar til brug på 90 min. (∼ 15 min. praktisk tid)
• Rens proteiner hurtigt ved hurtigt at fjerne ubundet farvestof ved hjælp af færdigpakket Zeba Farve- og biotinfjernelsessøjler (7K MWCO, kat.nr. A44299) til> 85 % restitution
• Indeholder detaljerede instruktioner til bestemmelse af mærkningsgrad (DOL)

Hvert proteinmærkningssæt indeholder alt, hvad du behøver for at udføre 3-5 separate mærkningsreaktioner og oprense de resulterende konjugater. Det reaktive farvestof har enten en succinimidylester (SE) eller en tetrafluorphenyl (TFP) esterdel, der reagerer effektivt med primære aminer af proteiner for at danne stabile –farveproteinkonjugater. Hvert af hætteglassene med reaktivt farvestof i sættet er tilstrækkeligt til at mærke 1 mg af en række oprensede proteiner, herunder vækstfaktorer, cytokiner, nanobodies, enzymer, celleadhæsionsmolekyler og antistoffer.

Direkte mærkning med fluoroforer gør det muligt at bruge flere primære antistoffer af samme isotype (afledt af samme art) i det samme eksperiment. Stabiliserende proteiner såsom BSA bør fjernes fra prøven før mærkning.

De forskellige proteinmærkningssæt

• Blå-fluorescerende Alexa Fluor 350— excitations- og emissionsmaksima på 346/442 nm
• Grøn-fluorescerende Alexa Fluor 488– excitations- og emissionsmaksima på 494/519 nm; exciteret ved hjælp af en 488 nm argon laserlinje og detekteret under standard FITC/Cy2 filtre
• Gul-fluorescerende Alexa Fluor 532– excitations- og emissionsmaksima på 530/554 nm; exciteret ved hjælp af en 532 nm Nd:YAG laserlinje og detekteret under standard Rhodamine 6G filtre
• Orange-fluorescerende Alexa Fluor 546– excitations- og emissionsmaksima på 554/570 nm; exciteret ved hjælp af en 543 nm He-Ne laserlinje og detekteret under standard TRITC/Cy3 filtre
• Orange-fluorescerende Alexa Fluor 555– excitations- og emissionsmaksima på 555/565 nm; exciteret ved hjælp af en 543 nm He-Ne laserlinje og detekteret under standard TRITC/Cy3 filtre
• Orange-rød-fluorescerende Alexa Fluor 568– excitations- og emissionsmaksima på 577/603 nm; exciteret ved hjælp af en 568 nm Kr laserlinje og detekteret under standard Rhodamine Red/Cy3.5 filtre
• Rød-fluorescerende Alexa Fluor 594– excitations- og emissionsmaksima på 590/617 nm; exciteret ved hjælp af en 594 nm Kr eller He-Ne laserlinje og detekteret under standard Texas Red filtre
• Langt-rød-fluorescerende Alexa Fluor 633– excitations- og emissionsmaksima på 632/647 nm
• Langt-rød-fluorescerende Alexa Fluor 647– excitations- og emissionsmaksima på 650/668 nm; exciteret ved hjælp af en 633 eller 635 nm Kr eller He-Ne laserlinje og detekteret under standard APC/Cy5 filtre.
• Langt-rød-fluorescerende Alexa Fluor 660– excitations- og emissionsmaksima på 663/690 nm
• Nær-IR-fluorescerende Alexa Fluor 680– excitations- og emissionsmaksima på 680/700 nm
• Grønt-fluorescerende Fluorescein-EX– excitations- og emissionsmaksima på 494/518 nm
• Oregon Green 488– excitations- og emissionsmaksima på 496/524 nm
• Pacific Blue–et violet lys exciterbart farvestof med en excitations- og emissionsmaksima på 410/455 nm
• Texas Red-X– excitations- og emissionsmaksima på 595/615 nm
• DSB-X Biotin– Konjugater kan bindes reversibelt til biotinbindende proteiner såsom streptavidin eller avidin. Koncentrationen (mg/ml) af DSB-X Biotin-mærket antistofpræparat kan bestemmes ved at måle absorbansen af den dialyserede prøve ved 280 nm og dividere denne værdi med 1,3 eller 1,4, når den måles i opløsning i en kuvette med en 1 cm vejlængde. DSB-X Biotin absorberes ikke væsentligt ved 280 nm.

Til mærkning af mindre mængder antistoffer (∼ 100μ g), anbefaler vi vores antistofmærkningssæt. Se venligst brugervejledningen til proteinmærkningssættet for mere dybdegående information, protokoller, molekylvægte og mærkningsgrad for hvert farvestof.