Molecular Probes™ Fluo-4, AM, cellegennemtrængende

Mærkede calciumindikatorer er molekyler, der udviser en stigning i fluorescens ved binding af Ca²⁺. Fluo-3 er blevet brugt til at afbilde de rumlige dynamikker af Ca^2+- signalering, i flowcytometrieksperimenter med fotoaktivering af indelukkede chelatorer, sekundære budbringere og neurotransmittere samt til cellebaseret farmakologisk screening. Fluo-4 er en analog til fluo-3, hvor de to klorsubstituenter erstattes af fluoriner, hvilket resulterer i øget fluorescensexcitation ved 488 nm og dermed højere fluorescenssignalniveauer. Celler kan fyldes med AM-esterformer af disse calciumindikatorer ved at tilsætte den opløste indikator direkte til skåle med dyrkede celler. Disse indikatorer er nyttige til fluorescens- og konfokalmikroskopi, flowcytometri og mikropladescreening.

Calciumindikator (AM Ester) specifikationer:

• Label (Ex/Em af Ca²⁺–bundet form): Fluo-4 (494/506 nm)
• Stigning i fluorescensintensiteten ved binding Ca²⁺: >100 gange
• K_d for Ca²⁺ i buffer: ∼335 nM
• Udviser fluorescensforøgelse ved binding af Ca²⁺ med lille forskydning i bølgelængde

Brug af TPEN til kontrol af tungmetal-kationer

Derudover binder BAPTA-baserede indikatorer som disse forskellige tungmetal-kationer (f.eks. Mn²⁺, Zn²⁺, Pb²⁺) med væsentligt højere affinitet end Ca²⁺. Forstyrrelser i calciummålinger forårsaget af tilstedeværelsen af disse ioner kan kontrolleres ved hjælp af tungmetalselektiv kelator TPEN (Cat. Nr. T1210).

Flere valgmuligheder for fluorescerende calciumindikatorer

Vi tilbyder et stort udvalg af Molecular Probes™ calciumindikatorer til brug i forskellige eksperimentelle scenarier. For mere information, se Fluorescent Ca²⁺ Indikatorer Exciteret med synligt lys—afsnit 19.3 i håndbogen Molecular Probes™ .

For UV-excitable Ca^2+- indikatorer, proteinbaserede Ca²⁺ -indikatorer, konjugater af Ca^2+- indikatorer og for fluorescensbaserede indikatorer for andre metalioner (dvs. Mg²⁺, Zn²⁺) gennemgår Indikatorer for Ca²⁺, Mg²⁺, Zn²⁺ og Andre Metalioner—kapitel 19 i håndbogen Molecular Probes™ .

I reduceret tilstand er excitations- og emissionsmaksimumet for BODIPY™ 581/591 undecanosyre 581/591 nm; efter oxidation flytter proben excitation og emission til 488/510 nm.

Vi anbefaler at opløse i højkvalitets anhydrisk DMSO for lagerkoncentrationer på 1 til 5 mM.