Thermo Scientific™ T4 RNA Ligase (10 U/μ L)

• Kilde: E. coli -celler med et klonet gen 63 fra bakteriofag T4
• Molekylvægt: 43,6 kDa monomer

• Fraværet af ribonukleaser, exodeoxyribonukleaser, endodeoxyribonukleaser og fosfataser bekræftet ved passende kvalitetstest.

• E.coli -celler med et klonet gen 63 af bakteriofag T4

Molekylvægt:

• 43,6 kDa monomer

Definition af aktivitetsenhed:

• En enhed af enzymet katalyserer omdannelsen af 1nmol af 5ft.-[ ^32P ]-(A) _12-18 til en fosfatase-resistent form på 30 min. ved 37 °C
• Enzymaktivitet analyseres i følgende blanding: 50 mM Tris-HCl (pH 7,5), 10 mM _MgCl2 , 10 mM DTT, 1 mM ATP , 10 M μ5'-[ ^32P ]-(A) _12-18 (10 M μi 5 fod-terminaler)

Opbevaringsbuffer:

• Enzymet leveres i: 20 mM Tris-HCl (pH 7,5), 1 mM DTT, 50 mM KCl, 0,1 mM EDTA, 0,03 % (v/v) ELUGENT Rengøringsmiddel og 50 % (v/v) glycerol

10X reaktionsbuffer:

• 500 mM Tris-HCl (pH 7,5 ved 25 °C), 100 mM _MgCl2 , 100 mM DTT, 10 mM ATP

Hæmning og inaktivering:

• Inhibitorer: metalchelatorer, SH-gruppemodificerende reagenser (8).
• Inaktiveres ved opvarmning ved 70 °C i 10 min.

Anbefalet til:

RNA 3'-ende mærkning med cytidin 3',5'-bis [alfa- ^32P ] phosphat (1); Sammenføjning af RNA til RNA (2); Syntese af oligoribonukleotider og oligodeoxyribonukleotider (3, 4); Specifikke modifikationer af tRNA'er (5); Oligodeoxyribonukleotidligering til enkeltstrengede cDNA'er i 5 fod. RACE (hurtig amplifikation af cDNA-ender) (6); Stedspecifik generering af sammensatte primere til PCR (7)

Bemærk:

Den anbefalede BSA-koncentration i reaktionsblandingen er 0,1 mg/ml.