missing translation for 'onlineSavingsMsg'
Få mere at vide
  1. Home
  2. Products
  3. Enzymer og hæmmere
  4. Modificerende enzymer
  5. Thermo Scientific™ T4 Polynukleotidkinase (10 U/μ L)

Thermo Scientific™ T4 Polynukleotidkinase (10 U/μ L)

Artikelnummer. p-4521372 Shop alle Thermo Scientific produkter
Klik for at se tilgængelige muligheder
Mængde:
2500 U
500 U
Pakningsstørrelse:
2500 enheder
Denne vare kan ikke returneres. Se returpolicy

Artikelnummer. 10120670

Brand: Thermo Scientific™ EK0031

Venligst for at købe denne vare. Brug for en webkonto? Register dig hos os i dag!

279.50 DKK valid until 2025-12-19
BEDSTE tilbudspris! Brug kampagnekoden "24092" for at få din tilbudspris.
Denne vare kan ikke returneres. Se returpolicy

Beskrivelse

T4 polynukleotid kinase (T4 PNK) katalyserer overførslen af gamma-phosphat fra ATP til 5'-OH-gruppen af oligonukleotider, ss og dsDNA og RNA.

T4 polynukleotid kinase (T4 PNK) katalyserer overførslen af gamma-phosphat fra ATP til 5'-OH-gruppen af enkelt- og dobbeltstrengede DNA'er og RNA'er, oligonukleotider eller nukleosid 3'-monophosphater (fremreaktion). Reaktionen er reversibel. I nærværelse af ADP T4 Polynukleotidkinase udviser 5'-phosphatase-aktivitet og katalyserer udvekslingen af fosfatgrupper mellem 5'-P-oligo-polynukleotider og ATP (udvekslingsreaktion).

Enzymet er også en 3'-phosphatase.

  • Aktiv i restriktionsenzym, RT og T4 DNA Ligase buffere.
  • Kilde: E. coli -celler med et klonet pseT-gen fra bakteriofag T4
  • Molekylvægt: Enzymet er en homotetramer. Den består af fire identiske underenheder på 28,9 kDa
Kvalitetskontrol:
  • Fraværet af endo-, exodeoxyribonukleaser og ribonukleaser bekræftet ved passende kvalitetstest. Funktionelt testet til mærkning af 5ft.-termini af DNA
Kilde:
  • E.coli -celler med et klonet pseT -gen af bakteriofag T4
Molekylvægt:
  • Enzymet er en homotetramer. Den består af fire identiske underenheder på 28,9 kDa
Definition af aktivitetsenhed:
  • En enhed af enzymet overfører 1nmol gamma-phosphat fra ATP til 5 ft.-OH DNA på 30 min. ved 37 °C
  • Enzymaktivitet analyseres i følgende blanding: 100 mM Tris-HCl (pH 8,0), 10 mM MgCl2 , 5 mM DTT, 0,5 mM 5 ft.-OH DNA, 0,05 mM ATP og 0,1 MBq/ml [gamma- 33P ]-ATP
Opbevaringsbuffer:
  • Enzymet leveres i: 20mM Tris-HCl (pH 7,5), 25mM KCl, 0,1mM EDTA, 2mM DTT og 50% (v/v) glycerol
  • 10X reaktionsbuffer A (til fremadrettet reaktion): 500 mM Tris-HCl (pH 7,6 ved 25 °C), 100 mM MgCl2 , 50 mM DTT, 1 mM spermidin
  • 10X reaktionsbuffer B (til udvekslingsreaktion): 500 mM imidazol-HCl (pH 6,4 ved 25 °C), 180 mM MgCl2 , 50 mM DTT, 1 mM spermidin og 1 mM ADP
  • 24 % PEG-opløsning: 24 % (vægt/volumen) polyethylenglycol 6000
    • Hæmning og inaktivering:
    • Inhibitorer: metalchelatorer, fosfat- og ammoniumioner, KCl og NaCl i en koncentration højere end 50mM
    • Inaktiveres ved opvarmning ved 75 °C i 10 min. eller ved tilsætning af EDTA

    Anbefalet til:

    Mærkning af 5 ft.-termini af nukleinsyrer (3, 4), der skal anvendes som prober til hybridisering, prober til transkriptkortlægning, markører til gelelektroforese, primere til DNA-sekventering, primere til PCR; 5 ft.-phosphorylering af oligonukleotid, PCR-produkter, andet DNA eller RNA før ligering; Fosforylering af PCR-primere; Påvisning af DNA-modifikation ved [32P]-eftermærkningsassay (5, 6); Fjernelse af 3ft.-phosphatgrupper (2)

    Bemærk:

    Polyethylenglycol (PEG) og spermidin forbedrer hastigheden og effektiviteten af phosphoryleringsreaktionen (7). PEG anvendes i udvekslingsreaktionsblandingen. Som T4 Polynukleotidkinase hæmmes af ammoniumioner, brug natriumacetat til at præcipitere DNA før phosphorylering (1, 2).

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Tekniske data

Koncentration 10 U/μ L
Enzym T4 Polynukleotidkinase
Kompatibel buffer 10X reaktionsbuffer
Mængde 500 U
Produkttype T4 Polynukleotidkinase

Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.

Korrektion af produktindhold

Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.

Produkttitel

Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.

Mange tak! Din feedback er blevet sendt. Hos Fisher Scientific arbejder vi altid på at forbedre vores indhold for dig. Vi sætter pris på din feedback.