Thermo Scientific™ RNase H (5 U/μ L)

• Hydrolyserer ikke phosphodiesterbindingerne i enkeltstrenget og dobbeltstrenget DNA og RNA

• Fraværet af endo-, exodeoxyribonukleaser og ribonukleaser bekræftet af passende kvalitetstests

Kilde:

• E. coli MRE-600 celler

Molekylvægt:

• 18,4 kDa monomer

Definition af aktivitetsenhed:

• En enhed af enzymet katalyserer dannelsen af 1nmol syreopløselige produkter på 20 min. ved 37 °C
• Enzymaktivitet analyseres i følgende blanding: 20 mM Tris-HCl (pH 7,8), 40 mM KCI, ₈ mM MgCl2, 1 mM DTT, 24 M [ μ^3H ]-poly(A)· poly(dT), 0,03 mg/ml BSA, 4 % (v/v) glycerol

• Enzymet leveres i: 25mM HEPES-KOH (pH 8,0), 50mM KCl, 0,1mM EDTA, 1mM DTT, 0,1mg/ml BSA og 50% (v/v) glycerol

10X reaktionsbuffer:

• 200 mM Tris-HCl (pH 7,8), 400 mM KCI, 80 mM _MgCl2 , 10 mM DTT

Hæmning og inaktivering:

• Inhibitorer: metalchelatorer, SH-blokerende reagenser
• Inaktiveres ved opvarmning ved 65 °C i 10 min.

Anbefalet til:

• Fjernelse af mRNA før syntese af anden streng cDNA (1)
• RT-PCR og QRT-PCR: fjernelse af RNA efter første streng cDNA syntese
• Fjernelse af poly(A)-sekvenserne af mRNA efter hybridisering med oligo(dT) (2)
• Stedspecifik spaltning af RNA (3)
• Undersøgelser af in vitro polyadenyleringsreaktionsprodukter