Thermo Scientific™ RevertAid H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit

Thermo Scientific RevertAid H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit er et komplet system til effektiv syntese af første streng cDNA fra RNA skabeloner. Sættet indeholder RevertAid H minus omvendt Transcriptase , som har en punktmutation, der fuldstændigt eliminerer RNase H-aktivitet. Derfor nedbryder det ikke RNA i RNA-DNA-hybrider under syntese af den første streng cDNA.

Funktioner af RevertAid H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit inkluderer:
• Høje udbytter af førstestrengs cDNA i fuld længde op til 13 kb
• Forøgede reaktionstemperaturer på 42 –55 °C
•Leveres med rekombinanten RiboLock RNase-hæmmer
• Komplet sæt inkluderer oligo(dT) ₁₈ og tilfældige hexamer primere

Anvendelser Første
•streng cDNA syntese til RT-PCR og RT-qPCR
• Konstruktion af cDNA-biblioteker i fuld længde
• Antisense RNA syntese

Yderligere funktioner Den
rekombinante RiboLock RNase-hæmmer, der leveres med sættet, beskytter effektivt RNA-skabelonen mod nedbrydning. Det er fuldt kompatibelt med omvendt transkriptionsreaktion, da det opretholder aktivitet ved temperaturer op til 55 °C. Sættet leveres med både oligo(dT) ₁₈ og random hexamer primere. Oligo(dT) _18- primeren annealer selektivt til poly(A)-halen af mRNA. Tilfældige hexamer primere kræver ikke tilstedeværelsen af poly(A), derfor kan de bruges til transkription af de 5’ -enderegioner af mRNA eller til cDNA-syntese under anvendelse af RNA uden poly(A)-halen, f.eks. mikroRNA'er. Genspecifikke primere kan også anvendes sammen med sættet. Den første streng cDNA kan anvendes direkte som en skabelon i PCR, real-time PCR eller i anden streng cDNA syntese.