Få mere at vide
Beskrivelse
Lambda DNA fordøjet med PstI, 0,7% agarose, 28 spaltningssteder
konventionelle restriktionsendonukleaser er en stor samling af højkvalitets restriktionsenzymer, optimeret til at arbejde i en af bufferne i Five Buffer System. Derudover leveres den universelle Tango-buffer for bekvemmelighed ved dobbeltfordøjelser. Alle enzymerne udviser 100 % aktivitet under de anbefalede buffer- og reaktionsbetingelser. For at sikre ensartet ydeevne, Thermo Scientific restriktionsenzymreaktionsbuffere indeholder forblandet BSA, som øger stabiliteten af mange enzymer og binder kontaminanter, der kan være til stede i DNA-præparater.
5'..CTGCA▵G...3'
3'..G▵ACGT C...5'
Betingelser for 100 % aktivitet
- 1 X buffer O: 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 ved 37 °C), 10 mM MgCl2 , 100 mM NaCl og 0,1 mg/ml BSA
- Inkuber ved 37 °C
Opbevaringsbuffer
- PstI leveres i: 10 mM Tris-HCl (pH 7,4 ved 25 °C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,15 % Triton X-100 0,2 mg/ml BSA og 50% (v/v) glycerol
Ligering og genudspaltning
- Efter 50 gange overfordøjelse med PstI, kan mere end 95 % af DNA-fragmenterne ligeres og skæres igen
Methyleringseffekter
- Dam: overlapper aldrig— ingen effekt
- Dcm: overlapper aldrig— ingen effekt
- CpG: overlapper aldrig— ingen effekt
- EcoKI: overlapper aldrig— ingen effekt
- EcoBI: overlapper aldrig— ingen effekt
Fordøjelse af agarose-indlejret DNA
- Minimum 5 enheder af enzymet er påkrævet for fuldstændig fordøjelse af μ1 g agarose-indlejret lambda-DNA på 16 timer
Kompatible ender
- Alw21I, ApaI, BseSI, Eco24I, Mph1103I, PstI, SacI, SdaI
Bemærk:
Betingelser med høj pH, lavt saltindhold, højt glycerol, 8 % DMSO kan forårsage stjerneaktivitet (Malyguine, E., et al., Gene, 8, 163-177, 1980). Omgivende sekvenser: tilstedeværelsen af tilstødende kørsler af GC-basepar giver betydelig modstand mod spaltning (Armstrong, K. og Bauer, WR, NAR, 10, 993-1007, 1982). 100 % dUTP-inkorporering ved genkendelsesstedet reducerer PstI-spaltning til 25 % (Glenn, TC, et al., Biotechniques, 17, 1086-1090, 1994). PstI vil ikke skære AGCTGCAG, når det methyleres med AluI-methyltransferase.
Tekniske data
Tekniske data
| Koncentration | 10 U/μ L |
| Methyleringsfølsomhed | Ikke Dam-methyleringsfølsom, Ikke Dcm-methyleringsfølsom, Ikke CpG-methyleringsfølsom |
| Enzym | Pst I |
| Kompatibel buffer | 10X buffer O |
| Følsom over for varmeinaktivering | Nej |
| Optimal reaktionstemperatur | 37 °C |
| Type IIS RE | Nej |
| Mængde | 5 x 3.000 enheder |
| Produkttype | Restriktionsenzym |
| Forskningskategori | Traditionel kloning |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.