Få mere at vide
Beskrivelse
Lambda DNA ( dcm -) fordøjet med Eco31I (BsaI), 0,7% agarose, 2 spaltningssteder
konventionelle restriktionsendonukleaser er en stor samling af højkvalitets restriktionsenzymer, optimeret til at arbejde i en af bufferne i Five Buffer System. Derudover leveres den universelle Tango-buffer for bekvemmelighed ved dobbeltfordøjelser. Alle enzymerne udviser 100 % aktivitet under de anbefalede buffer- og reaktionsbetingelser. For at sikre ensartet ydeevne, Thermo Scientific restriktionsenzymreaktionsbuffere indeholder forblandet BSA, som øger stabiliteten af mange enzymer og binder kontaminanter, der kan være til stede i DNA-præparater.
5'...GGTCTC (N) 1 ▵...3'
3'...CCAGAG (N) 5 ▵...5'
Betingelser for 100 % aktivitet:
- 1 x buffer G: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 ved 37 °C), 10 mM MgCl2, 50 mM NaCl og 0,1 mg/ml BSA
- Inkuber ved 37 °C
Opbevaringsbuffer:
- Eco31I leveres i: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 ved 25 °C), 200 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA og 50 % (v/v) glycerol
Ligering og genudspaltning:
- Efter 50 gange overfordøjelse med Eco31I kan mere end 95 % af DNA-fragmenterne ligeres og skæres igen
Methyleringseffekter:
- Dam: overlapper aldrig - ingen effekt
- Dcm: kan overlappe-spaltning svækket
- CpG: kan overlappe-spaltning svækket
- EcoKI: overlapper aldrig - ingen effekt
- EcoBI: kan overlappe-effekt ikke bestemt
Fordøjelse af agarose-indlejret DNA:
- Minimum 5 U af enzymet er påkrævet for fuldstændig fordøjelse af μ1 g agarose-indlejret lambda-DNA på 16 timer
Bemærk:
Analyseret ved anvendelse af lambda-DNA ( dcm- ) (#SD0021), som et af de to Eco31I-genkendelsessteder i lambda-DNA er vanskeligt at spalte. Eco31I-spaltning er svækket af overlappende dcm -methylering. For at undgå dcm- methylering skal du bruge en dam- , dcm- stamme såsom GM2163 (#M0099). Lavt saltindhold, højt glycerol (> 5%) koncentrationer, pH> 8,0 eller et stort overskud af enzym kan resultere i stjerneaktivitet. Eco31I spalter nedstrøms for dets genkendelsessted og kan generere alle ønskede 4 base 5'-udhæng. Denne funktion er nyttig til direkte PCR-produktkloning.
Tekniske data
Tekniske data
| Koncentration | 10 U/μ L |
| Methyleringsfølsomhed | CpG-methyleringsfølsom, Ikke CpG-methyleringsfølsom, Ikke Dam-methyleringsfølsom |
| Enzym | Eco31I (BsaI) |
| Kompatibel buffer | 10X buffer G |
| Følsom over for varmeinaktivering | Ja |
| Optimal reaktionstemperatur | 37 °C |
| Type IIS RE | Ja |
| Mængde | 1.000 enheder |
| Produkttype | Restriktionsenzym |
| Forskningskategori | Skarløs kloning |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.