Få mere at vide
Thermo Scientific™ Eco31I (BsaI) (10 U/μ L)
Shop alle Thermo Scientific produkterBeskrivelse
Lambda DNA ( dcm -) fordøjet med Eco31I (BsaI), 0,7% agarose, 2 spaltningssteder
konventionelle restriktionsendonukleaser er en stor samling af højkvalitets restriktionsenzymer, optimeret til at arbejde i en af bufferne i Five Buffer System. Derudover leveres den universelle Tango-buffer for bekvemmelighed ved dobbeltfordøjelser. Alle enzymerne udviser 100 % aktivitet under de anbefalede buffer- og reaktionsbetingelser. For at sikre ensartet ydeevne, Thermo Scientific restriktionsenzymreaktionsbuffere indeholder forblandet BSA, som øger stabiliteten af mange enzymer og binder kontaminanter, der kan være til stede i DNA-præparater.
5'...GGTCTC (N) 1 ▵...3'
3'...CCAGAG (N) 5 ▵...5'
Betingelser for 100 % aktivitet:
- 1 x buffer G: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 ved 37 °C), 10 mM MgCl2, 50 mM NaCl og 0,1 mg/ml BSA
- Inkuber ved 37 °C
Opbevaringsbuffer:
- Eco31I leveres i: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 ved 25 °C), 200 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA og 50 % (v/v) glycerol
Ligering og genudspaltning:
- Efter 50 gange overfordøjelse med Eco31I kan mere end 95 % af DNA-fragmenterne ligeres og skæres igen
Methyleringseffekter:
- Dam: overlapper aldrig - ingen effekt
- Dcm: kan overlappe-spaltning svækket
- CpG: kan overlappe-spaltning svækket
- EcoKI: overlapper aldrig - ingen effekt
- EcoBI: kan overlappe-effekt ikke bestemt
Fordøjelse af agarose-indlejret DNA:
- Minimum 5 U af enzymet er påkrævet for fuldstændig fordøjelse af μ1 g agarose-indlejret lambda-DNA på 16 timer
Bemærk:
Analyseret ved anvendelse af lambda-DNA ( dcm- ) (#SD0021), som et af de to Eco31I-genkendelsessteder i lambda-DNA er vanskeligt at spalte. Eco31I-spaltning er svækket af overlappende dcm -methylering. For at undgå dcm- methylering skal du bruge en dam- , dcm- stamme såsom GM2163 (#M0099). Lavt saltindhold, højt glycerol (> 5%) koncentrationer, pH> 8,0 eller et stort overskud af enzym kan resultere i stjerneaktivitet. Eco31I spalter nedstrøms for dets genkendelsessted og kan generere alle ønskede 4 base 5'-udhæng. Denne funktion er nyttig til direkte PCR-produktkloning.
Tekniske data
Tekniske data
| Koncentration | 10 U/μ L |
| Methyleringsfølsomhed | CpG-methyleringsfølsom, Ikke CpG-methyleringsfølsom, Ikke Dam-methyleringsfølsom |
| Enzym | Eco31I (BsaI) |
| Kompatibel buffer | 10X buffer G |
| Følsom over for varmeinaktivering | Ja |
| Optimal reaktionstemperatur | 37 °C |
| Type IIS RE | Ja |
| Mængde | 1.000 enheder |
| Produkttype | Restriktionsenzym |
| Forskningskategori | Skarløs kloning |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.