Få mere at vide
Thermo Scientific™ FastAP Termofølsom alkalisk fosfatase (1 U/μ L)
Shop alle Thermo Scientific produkterBeskrivelse
FastAP Termosensitiv alkalisk phosphatase katalyserer frigivelsen af 5'- og 3'-phosphatgrupper fra DNA, RNA og nukleotider. Dette enzym fjerner også fosfatgrupper fra proteiner.
FastAP er en ny alkalisk fosfatase, som er aktiv i alle Thermo Scientific restriktionsenzymbuffere såvel som i PCR-buffere. Den dephosphorylerer alle typer DNA-ender (stumpe, 5'- og 3'-overhæng) på 10 minutter ved 37 °C. Enzymet inaktiveres på 5 minutter ved 75 °C. Derfor er fjernelse af alkalisk phosphatase ikke nødvendig før ligering.
Højdepunkter
- Rekombinant enzym
- Hurtig dephosphorylering – 10 minutter ved 37 °C
- Hurtig og fuldstændig inaktivering – 5 minutter ved 75 °C
- Samtidig fordøjelse og dephosphorylering af vektor-DNA
- 100 % aktiv i restriktionsenzym og PCR-buffere
- Én protokol for alle typer DNA-ender:
- 5’ -udhæng
- 3’ -udhæng
- stumpe ender
- enkelte nukleotider
- PCR-oprydning i forbindelse med Exo I
- Protein dephosphorylering
Applikationer
- Dephosphorylering af kloningsvektor-DNA for at forhindre recirkularisering under ligering
- Samtidig fordøjelse og dephosphorylering af vektor-DNA
- PCR produkt oprydning: nukleotidnedbrydning før sekventering af PCR-produkt
- Dephosphorylering af nukleinsyre 5'-termini før mærkning med T 4 polynukleotid kinase
- Andre anvendelser, hvor dephosphorylering af DNA- og RNA-substrater er nødvendig
- Protein dephosphorylering
Note
- Indbinding af FastAP Termofølsom alkalisk fosfatase over for DNA kan resultere i et båndskifte i agarosegeler. For at undgå dette skal du inkubere prøver med 6X DNA Loading Dye& SDS-opløsning °ved 65 C i 10 minutter, og afkøl på is før elektroforese.
- FastAP Termosensitiv alkalisk fosfatase er aktiv i alle restriktionsenzymbuffere og kan tilsættes direkte til fordøjet DNA. Varmeinaktivering af restriktionsenzymet før dephosphoryleringsreaktion er ikke nødvendig.
Tekniske data
Tekniske data
| Koncentration | 1 U/μl |
| Enzym | Fosfatase |
| Kompatibel buffer | PCR-buffer, enzymbuffer |
| Mængde | 300 enheder |
| Produkttype | Alkalisk fosfatase |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.