Få mere at vide
Thermo Scientific™ FastAP Termofølsom alkalisk fosfatase (1 U/μ L)
Shop alle Thermo Scientific produkterBeskrivelse
FastAP Termosensitiv alkalisk phosphatase katalyserer frigivelsen af 5'- og 3'-phosphatgrupper fra DNA, RNA og nukleotider. Dette enzym fjerner også fosfatgrupper fra proteiner.
FastAP er en ny alkalisk fosfatase, som er aktiv i alle Thermo Scientific restriktionsenzymbuffere såvel som i PCR-buffere. Den dephosphorylerer alle typer DNA-ender (stumpe, 5'- og 3'-overhæng) på 10 minutter ved 37 °C. Enzymet inaktiveres på 5 minutter ved 75 °C. Derfor er fjernelse af alkalisk phosphatase ikke nødvendig før ligering.
Højdepunkter
- Rekombinant enzym
- Hurtig dephosphorylering – 10 minutter ved 37 °C
- Hurtig og fuldstændig inaktivering – 5 minutter ved 75 °C
- Samtidig fordøjelse og dephosphorylering af vektor-DNA
- 100 % aktiv i restriktionsenzym og PCR-buffere
- Én protokol for alle typer DNA-ender:
- 5’ -udhæng
- 3’ -udhæng
- stumpe ender
- enkelte nukleotider
- PCR-oprydning i forbindelse med Exo I
- Protein dephosphorylering
Applikationer
- Dephosphorylering af kloningsvektor-DNA for at forhindre recirkularisering under ligering
- Samtidig fordøjelse og dephosphorylering af vektor-DNA
- PCR produkt oprydning: nukleotidnedbrydning før sekventering af PCR-produkt
- Dephosphorylering af nukleinsyre 5'-termini før mærkning med T 4 polynukleotid kinase
- Andre anvendelser, hvor dephosphorylering af DNA- og RNA-substrater er nødvendig
- Protein dephosphorylering
Note
- Indbinding af FastAP Termofølsom alkalisk fosfatase over for DNA kan resultere i et båndskifte i agarosegeler. For at undgå dette skal du inkubere prøver med 6X DNA Loading Dye& SDS-opløsning °ved 65 C i 10 minutter, og afkøl på is før elektroforese.
- FastAP Termosensitiv alkalisk fosfatase er aktiv i alle restriktionsenzymbuffere og kan tilsættes direkte til fordøjet DNA. Varmeinaktivering af restriktionsenzymet før dephosphoryleringsreaktion er ikke nødvendig.
Tekniske data
Tekniske data
| Koncentration | 1 U/μl |
| Enzym | Fosfatase |
| Kompatibel buffer | PCR-buffer, enzymbuffer |
| Mængde | 300 enheder |
| Produkttype | Alkalisk fosfatase |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.