Thermo Scientific™ EZ-Link™ Sulfo NHS-LC-LC-Biotin, No-Weigh™ Format

Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin muliggør enkel og effektiv biotinmærkning af antistoffer, proteiner og enhver anden primær aminholdig –makromolekyler. Specifik mærkning af celleoverfladeproteiner er en anden almindelig anvendelse for disse unikke vandopløselige og membranimpermeable reagenser.

Thermo Scientific No-Weigh produkter er specialreagenser, der leveres i et præ-aliquoteret format. Den forvejede emballage forhindrer tab af reagensreaktivitet og kontaminering over tid ved at eliminere den gentagne åbning og lukning af hætteglasset. Formatet muliggør brug af et frisk hætteglas med reagens hver gang, hvilket eliminerer besværet med at veje små mængder reagenser og reducerer bekymringer over reagensstabilitet.

Funktioner af EZ-Link Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin:

• Proteinmærkning af —biotinylatantistoffer for at lette immobilisering, oprensning eller påvisning ved hjælp af streptavidinharpikser eller prober
• Celleoverflademærkning biotinylerer —kun overfladeproteiner af hele celler, fordi det negativt ladede reagens ikke gennemtrænger cellemembraner
• Amin-reaktivt —reagerer med primære aminer (-NH2), såsom sidekæden af lysiner (K) eller amino-termini af polypeptider
• Opløselig —ladet sulfo-NHS-gruppe øger reagensvandopløseligheden sammenlignet med almindelige NHS-esterforbindelser
• Irreversible —former permanente amidbindinger; afstandsarm kan ikke kløves
• Dobbelt lang— afstandsarm (samlet længde tilføjet til målet) er 30,5 ångstrøm; denne forlængede arm hjælper med at minimere sterisk hindring for biotinbinding

Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin er den længste af tre meget ens EZ-Link Reagenser, der er vandopløselige, ikke-spaltelige og muliggør enkel og effektiv biotinylering af antistoffer, proteiner og andre primære aminholdige makromolekyler i opløsning. Specifik mærkning af celleoverfladeproteiner er en anden almindelig anvendelse for disse unikke vandopløselige og membranimpermeable reagenser. De tre Sulfo-NHS-esterreagenser adskiller sig kun i deres afstandsarmlængder og giver mulighed for at optimere mærknings- og detektionsforsøg, hvor sterisk hindring af biotinbinding er en vigtig faktor.

Vi fremstiller biotinreagenser for at sikre den højest mulige samlede produktintegritet, konsistens og ydeevne til de tilsigtede forskningsapplikationer.

N -Hydroxysulfosuccinimid (NHS) estere af biotin er den mest populære type biotinyleringsreagens. NHS-aktiverede biotiner reagerer effektivt med primære aminogrupper (-NH2) i alkaliske buffere for at danne stabile amidbindinger. Proteiner (f.eks. antistoffer) har typisk flere primære aminer, der er tilgængelige som mål for mærkning, herunder sidekæden af lysin (K) rester og N-terminalen af hvert polypeptid.

Varianter af biotin NHS-esterreagenser er forskellige i længde, opløselighed, cellepermeabilitet og spaltbarhed. Ikke-sulfonerede NHS-biotiner er cellegennemtrængelige, men skal opløses i organisk opløsningsmiddel såsom DMSO eller DMF. Sulfo-NHS biotiner (og dem med pegylerede spacere) er direkte vandopløselige, men ikke membranpermeable. Varianter indeholdende disulfidbindinger kan spaltes ved hjælp af reduktionsmidler, hvilket gør det muligt for biotingruppen at blive adskilt fra det mærkede protein.