Thermo Scientific™ EZ-Link™ Maleimid-PEG Solid-Phase Biotinylation Kit - Mini-Spin kolonner

Dette innovative antistofmærkningssystem bruger nikkel-cheleret agarose til midlertidigt at immobilisere antistofmolekyler via deres histidinrige Fc-regioner. Når først det holdes på plads på harpiksen, kan antistoffet forsigtigt reduceres ved hængselregionen for at producere frie sulfhydryler, som derefter biotinyleres med Maleimid-PEG2-Biotin-reagenset. Overskydende mærkningsreagens og biprodukter vaskes derefter væk, før det mærkede og oprensede antistof genvindes fra harpiksen ved hjælp af en mild imidazolopløsning. Ingen gelfiltrering eller dialyse er nødvendig. Kits til reaktioner i lille skala (0,1 til 1 mg antistof) og større skalaer (1 til 10 mg antistof) tilbydes.

Højdepunkter:

Hurtig mærkning og oprensning— hele proceduren tager kun omkring to timer

Nem fjernelse af brugt og overskydende mærkningsreagens— vask blot reaktionsbiprodukterne væk uden —behov for dialyse eller gelfiltrering

Ingen fortyndingseffekter— fastfase-metoden gør det muligt for initialt fortyndede antistoffer at blive udvundet i et mindre volumen efter mærkning

Optimerede protokoller— specifikke protokoller for antistof sikrer skånsom disulfidreduktion og passende niveau af mærkning for at minimere muligheden for inaktivering

Højtydende biotinreagens— Malemid-PEG2-Biotin bruger effektiv, sulfhydryl-specifik maleimidkemi og inkluderer hydrofil polyethylenglycol (PEG) spacer, der stabiliserer langtidsopløseligheden af mærkede antistoffer

Otte biotin-mærkningseksperimenter pr. sæt— Thermo Scientific No-Weigh Pakning sikrer, at biotinreagenset er fuldt aktivt til otte separate eksperimenter

Produktdetaljer:

EZ-Link Solid-Phase Biotinylation Kits bruger en innovativ strategi for antistofbiotinylering, der forenkler processen i mange henseender, hvilket gør vellykket biotinylering mulig for nybegyndere og eksperter. Strategien involverer immobilisering af antistoffet til en metalchelateret affinitetsbærer og udførelse af biotinyleringen i den faste fase. Antistoffer binder let til metalchelaterede bærere, såsom nikkel eller cobalt, og binder primært gennem den histidinrige Fc-region af IgG-klasse antistoffer. Denne funktion gør det nemt at udføre derivatiseringskemien, mens antistoffet er bundet til bæreren. Denne strategi letter reagenslevering og fjernelse af brugt reagens. Det resulterende modificerede antistof fjernes derefter selektivt fra bæreren ved eluering med en bufret imidazolopløsning. Fastfase-tilgangen til antistofbiotinylering giver mere kontrol over reaktionen. For eksempel: Reagens- og antistofforhold og reaktionstider kan justeres for at opnå den rette grad af biotinylering til den tilsigtede anvendelse. Sættene indeholder et vandigt opløseligt sulfhydrylgruppespecifikt reagens (Maleimide-PEG2-Biotin), der er målrettet mod tilgængelige sulfhydrylgrupper (-SH) på overfladen af antistoffet. Formatet kan anvendes på multi-milligram antistofniveau i 1 ml kolonnekittet (delnr. 21920) eller til lave mikrogram antistofniveauer til biotinylering ved hjælp af mini-spin kolonnekittet (del nr. 21930).