Applied Biosystems™ ExoSAP-IT™ Express PCR Product Cleanup

Nøgletræk ved ExoSAP-IT™Ekspres reagens:

• 5 minutters protokol —Hurtigste ekspeditionstid til resultater
• Et-rør, et-trins PCR-oprydning —Tilføj ExoSAP-ITUdtryk direkte til PCR-produkt
• Ny enzymteknologi —Irreversibelt inaktiveret på kun et minut ved 80 °C
• Bevar PCR-prøver —100 % genvinding af PCR-produkter, uanset amplikonlængde
• Eliminer spin-søjler eller -perler. —Reducerer tid og fejl betydeligt, mens udbyttet øges
• Kompatibel —Ingen interferens i downstream-applikationer
• Skalerbar —Behandl en bred vifte af volumener
• Flere formater —Enkeltrørs-, 8-rørsstrimmel- og 96-brønds pladeformater tilbyder fleksibilitet fra manuel pipettering til automatiserede arbejdsgange
• Bliv grøn —Generer mindre affald med en enkeltrørsopløsning til PCR-oprydning

Oversigt

Det er nødvendigt at fjerne overskydende primere og ikke-inkorporerede nukleotider fra PCR-reaktionen før sekventering.

En enzymatisk oprydningsmetode giver præcision og hastighed over teknologier såsom spin-søjler eller perler. ExoSAP-ITExpress reagens består af to hydrolytiske enzymer, en modificeret Exonuclease I og Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP ), i en specielt formuleret buffer. Det bruges til at fjerne overskydende primere og dNTP'er fra en PCR-blanding uden interferens i downstream-applikationer. Denne unikke, meget stabile løsning med ét rør giver større selvtillid og overlegne sekventeringsresultater (fig. 1).

Innovativ løsning

Vores forskere konstruerede Exonuclease I til at have øget varmelabilitet, hvilket muliggør inaktivering på kun 1 minut (fig. 2). ExoSAP-ITExpress -reagens tilsættes direkte til PCR-produktet til en 4 minutters oprydning ved 37 C, °efterfulgt af en 1 minuts inaktivering ved 80 °C, hvilket giver nøjagtige og ensartede resultater på kun 5 minutter.

Hurtigste PCR-oprydningsmetode

Denne nye teknologi giver mulighed for en betydelig reduktion i prøveoprydningstiden med minimale trin, hvilket giver den enkleste arbejdsgang (fig. 3). ExoSAP-ITExpress -reagens tilbyder hurtige ekspeditionstider og forbedret effektivitet af ressourcer, samtidig med at den leverer den kvalitet, som forskerne har vænnet sig til, når de bruger ExoSAP-IT til PCR-produktoprydning.

Opbevar PCR-prøver— enkelt et trin, 100% genopretning

De ExoSAP-ITExpress enzymatisk oprydningsmetode er designet til at minimere fejl ved at reducere din protokol til et enkelt pipettetrin, hvilket giver mulighed for automatiseret eller manuel behandling fra et enkelt rør eller mikrotiterbrønd. ExoSAP-ITExpress -reagens overgår konkurrenterne ved at sikre 100 % genvinding af alle amplikonstørrelser, både korte og lange (tabel 1).

ExoSAP-ITExpress PCR Product Cleanup er aktiv i almindeligt anvendte PCR-buffere, så der kræves ingen bufferudveksling. Efter behandling, ExoSAP-ITExpress- reagens inaktiveres ved opvarmning ved 80 C °i 1 minut. De behandlede PCR-produkter er derefter klar til efterfølgende analyse i applikationer, der kræver, at DNA er fri for overskydende primere og nukleotider.