Invitrogen™ eBioscience™ Annexin V Apoptose Detection Kits

Beskrivelse

Nemt at skelne celler, der gennemgår tidlig og sen apoptose med eBioscience og Annexin V Apoptose Detection kits til flowcytometri analyse. Disse kits anvender levedygtighedsfarvekonjugeret annexin V til at mærke phosphatidylserin (PS), en tidlig markør for apoptose, på den ekstracellulære membran. I det sene stadie af apoptose, når celleintegriteten går tabt, krydser både annexin V og levedygtighedsfarvestoffet og binder PS på det indre af plasmamembranen.

Annexiner er en familie af calciumafhængige phospholipid-bindende proteiner, der fortrinsvis binder phosphatidylserin (PS). Under normale fysiologiske forhold er PS overvejende lokaliseret i den indre folder af plasmamembranen. Ved påbegyndelse af apoptose mister PS sin asymmetriske fordeling over phospholipid-dobbeltlaget og translokeres til den ekstracellulære membran-folder, der markerer celler som mål for fagocytose. Når først på den ydre overflade af membranen, kan PS påvises med fluorescensmærket annexin V på en calciumafhængig måde.

Ved tidlig apoptose udelukker plasmamembranen levedygtighedsfarvestoffer som propidiumiodid (PI), 7-AAD eller fikserbare levedygtighedsfarvestoffer som f.eks. eFluor 450. Disse celler vil farves med annexin V, men ikke et levedygtighedsfarvestof, og dermed skelne celler i tidlig apoptose. I det sene stadie af apoptose mister cellemembranen imidlertid integritet, hvorved annexin V også får adgang til PS i det indre af cellen. Et levedygtighedsfarvestof kan bruges til at opløse disse sene apoptotiske og nekrotiske celler (annexin V, levedygtighedsfarvepositive) fra de tidlige apoptotiske celler (annexin V-positiv, levedygtighedsfarve-negativ).

Nuværende levedygtighed pletter tilgængelige med eBioscience Annexin V Apoptose Detection kits inkluderer FITC, eFluor 450, allophycocyanin (APC), phycoerythrin (PE), PE-cyanin7 og biotin.