Molecular Probes™ Døde celle apoptosesæt med Annexin V til flowcytometri

Der er flere fordele ved at bruge Dead Cell Apoptosis kits med Annexin V til flowcytometri for at analysere cellelevedygtighed:

Overlegen lysstyrke
I modsætning til andre Annexin V-sæt, der har lavere proteinkoncentrationer eller oprensningsniveauer, er Annexin V Alexa Fluor 488-konjugat er optimeret til flowcytometri for at give den største adskillelse mellem apoptotiske og levende celler. De Alexa Fluor 488 farvestof er et overlegent grønt-fluorescerende farvestof med et spektrum svarende til fluorescein (FITC).

Høj bindingseffektivitet
Annexin V-konjugater er fremstillet af et højt oprenset cys-annexin, hvilket resulterer i højere bindingseffektivitet og ekstremt nøjagtig karakterisering af den apoptotiske proces.

Multi-parametrisk
Mange publikationer kræver mindst to forskellige måder at identificere apoptotiske celler på. Dette multiparametriske sæt detekterer phosphatidylserin (PS) på cellemembranens cytoplasmatiske overflade, mens membranintegriteten bestemmes via propidiumiodid.

Dead Cell Apoptosis Kit med Annexin V Alexa Fluor 488& PI
Dead Cell Apoptosis Kit med Annexin V Alexa Fluor 488& Propidiumiodid (PI) (V13241, V13245) bruges i flowcytometri til at måle tidlig apoptose ved at detektere phosphatidylserin (PS) ekspression og membranpermeabilitet. Når celler farves med Annexin V og propidiumiodid, viser apoptotiske celler, der udtrykker PS, grøn fluorescens, som kan påvises i FITC-kanalen, og lav rød fluorescens. Døde eller nekrotiske celler viser lys rød fluorescens og ingen grøn fluorescens, mens levende celler ikke viser grøn eller rød fluorescens.

Dead Cell Apoptosis Kit med Annexin V PE og SYTOX Grøn
Dead Cell Apoptosis Kit med Annexin V PE og SYTOX Grøn detekterer PS eksternalisering i apoptotiske celler under flowcytometri ved brug af rekombinant annexin V konjugeret til det orange fluorescerende phycobiliprotein R-PE, mens døde celler detekteres med SYTOX Grøn nukleinsyrefarvning. Efter behandling med begge prober viser apoptotiske celler orange fluorescens, døde celler viser grøn fluorescens, og levende celler viser ringe eller ingen fluorescens. Disse populationer kan let skelnes i 530/30 nm og 585/42 nm båndpasfiltrene med et 488 nm laserflowcytometer.

Dead Cell Apoptosis Kit med Annexin V APC og SYTOX Grøn
Dead Cell Apoptosis Kit med Annexin V APC og SYTOX Green detekterer PS eksternalisering i apoptotiske celler under flowcytometri ved hjælp af rekombinant annexin V konjugeret til rød laser-exciteret allophycocyanin, og døde celler vha. SYTOX Grøn nukleinsyrefarvning. Apoptotiske celler påvises ved annexin V-binding til eksternaliseret PS. Levende celler viser lidt eller ingen fluorescens, apoptotiske celler viser rød fluorescens og meget lidt grøn fluorescens, og sene apoptotiske celler viser et højere niveau af rød og orange fluorescens. Disse populationer kan let skelnes ved hjælp af et flowcytometer, der har både 488 nm og 633 nm excitationskilder (en argon-ion-laser og en HeNe-laser).

Dead Cell Apoptosis Kit med Annexin V FITC og PI
Dead Cell Apoptosis Kit med Annexin V FITC og PI detekterer PS eksternalisering i apoptotiske celler ved hjælp af rekombinant annexin V konjugeret til grønt-fluorescerende FITC-farvestof og døde celler ved hjælp af PI. Nekrotiske celler, der farves med PI, viser rød fluorescens. Efter behandling med begge prober viser apoptotiske celler grøn fluorescens, døde celler viser rød og grøn fluorescens, og levende celler viser ringe eller ingen fluorescens.