Invitrogen™ CorrectASE™ Enzym

CorrectASE™ enzym fjerner uoverensstemmelser forårsaget af oligonuceotidsyntesefejl, hvilket fører til en 3 –10 gange reduktion af mutationer i dine syntetiske gener eller fragmenter.

Ved at introducere CorrectASE™ enzym i din gør-det-selv-gensyntese-arbejdsgang, kan du:

• Reducer antallet af mutationer i dit syntetiske gen eller fragment
• Reducer din arbejdstid ved kun at screene 2 –4 kloner i stedet for 10-16 kloner pr. syntetisk konstruktion
• Reducer dine omkostninger ved kun at sekventere –2 4 kloner i stedet for 10 –16 syntetiske gener

Forebyg uønskede mutationer

Kommercielt tilgængelige syntetiske oligonuceotider har en høj fejlrate under syntese, der spænder fra én pr. –300.1000 baser, afhængigt af kilden. Disse fejl forårsager rammeskift (deletion og insertion) og mismatch-mutationer under gensyntese. Inkubation med CorrectASE™ enzym fjerner begge typer mutationer.

Inkubationstrinnet med CorrectASE™ enzym indføres efter den indledende PCR-samling af oligonukleotider. PCR-produktet denatureres og genanneales, således at eventuelle mutationer vil være umatchede. CorrectASE™ enzym binder til de resulterende fejlparringer og skærer begge DNA-strenge 3' for fejlen. 3' til 5' exonukleaseaktiviteten af enzymet fjerner fejlene. En endelig PCR med en korrekturlæsende polymerase samler derefter de korrigerede fragmenter og øger dermed sandsynligheden for at isolere kloner med den korrekte sekvens. Afhængigt af den indkommende oligonuceotidkvalitet skal –kun 2 4 kloner screenes sammenlignet med –10 16 kloner i en arbejdsgang, der ikke inkluderer korrektionstrinnet. Inklusive CorrectASE™ enzym i din gensyntese arbejdsgang reducerer arbejdstid og sekventeringsomkostninger.