Få mere at vide
Invitrogen™ BLOCK-iT™ Inducerbart Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP
Beskrivelse
De BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi-ekspressionsvektorsæt kombinerer fordelene ved traditionelle RNAi-vektorer (stabil ekspression og evnen til at bruge viral levering) med muligheder for vævsspecifik ekspression og multiple target-knockdown fra det samme transkript. De BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kits og BLOCK-iT™ Lentiviral Pol II miR RNAi-ekspressionssystemer er designet til at udtrykke kunstige miRNA'er, som er konstrueret til at have 100 % homologi med din målsekvens og vil resultere i målspaltning. Bruger Invitrogen's prisvindende BLOCK-iT™ RNAi Designer, over 70% af konstruktionerne producerer mere end 70% knockdown.
De Invitrogen Pol II ekspressionsfamilie af vektorer omfatter:
- Stærk ekspression fra CMV umiddelbart tidlige promotor, med mulighed for at bruge vævsspecifikke eller andre regulerede promotorer via MultiSite Gateway™ rekombination.
- Kompatibilitet med mange af Invitrogen's Gateway™ destination (DEST) vektorer til genekspression.
- Evne til at kontrollere initieringen af RNAi-responset med en ny BLOCK-iT™ Inducerbart Pol II miR RNAi ekspressionsvektorkit m/EmGFP.
- En ny destinationsvektor i BLOCK-iT™HiPerform™ Lentiviralt PolII miR RNAi-ekspressionssystem med EmGFP. Den nye vektor indeholder en mRNA-stabiliserende sekvens (WPRE) og en nuklear importsekvens (cPPT), som genererer op til 5 gange højere virustitre og EmGFP-ekspressionsniveauer. Derudover udtrykkes blasticidinresistens fra muse-Pgk-1-promotoren for at undgå nedlukning efter flere passager.
- Co-cistronisk ekspression af Emerald GFP (EmGFP), hvilket resulterer i korrelation af EmGFP-ekspression med knockdown fra din miR RNAi.
- Ekspression af mere end én konstrueret miR RNAi-sekvens på det samme transkript, hvilket muliggør knockdown af flere gener samtidigt og generering af syntetiske fænotyper
Den nye BLOCK-iT™ Inducerbart Pol II miR RNAi-ekspressionsvektorkit med EmGFP giver mulighed for at regulere RNAi-eksperimenter. Dette sæt indeholder pT-REx-DEST30 Gateway™ vektor, som efter simple klonings- og shuttling-teknikker producerer en miR RNAi-ekspressionsvektor, der er egnet til inducerbar knockdown. pT-REx-DEST30 Gateway™ vektoren indeholder CMV-promotoren med to kopier af tetracyclinoperatoren (tetO2)-sekvensen, der tillader højt niveau og reguleret ekspression. Dette tillader studiet af tab af funktion i en stabilt transficeret cellelinje, selvom genet af interesse er essentielt. Også induktion af miR RNAi-ekspression kan standses, så fænotypiske ændringer kan måles under gendannelse af genfunktion.
For en række ekspressionsmuligheder kan miR RNAi-kassetten, som indeholder EmGFP (kun pcDNA ™6.2-GW/EmGFP-miR-vektor), miR-flankerende regioner og en miRNA, der er homolog med målet af interesse, let flyttes ind i en række DEST-vektorer. Dette sker igennem Gateway™ rekombinationsreaktioner, hvor miR RNAi-kassetten overføres til en pDONR™ vektor (BP-reaktion) og derefter ind i en DEST-vektor (LR-reaktion) efter eget valg. De HiPerform™ systemet har den nye pLenti6.4/RF R2/V5-DEST destinationsvektor til høje virustitere og EmGFP-ekspression.
Tekniske data
Tekniske data
| Produkttype | RNAi Expression Vector Kit |
| Oversigt | BLOCK-iT™ Inducible Pol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP, 20rxns, Liquid, CMV/TO Promorter, Transfection Delivery Method, Gateway™ Cloning Method, BLOCK-iT RNAi Vectors Type, Inducible System, GFP (EmGFP) Reporter, |
| Til brug med (applikation) | RNAi, epigenetics and non-coding RNA research, vector-based RNAi |
| Inkluderer | The BLOCK-iTTM Inducible PolII miR RNAi Expression Vector Kit w/EmGFP contains a cloning box with linearized pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR, 10X annealing buffer, T4 DNA Ligase, 5X DNA Ligation buffer, lacZ control oligo, lacZ control plasmid, negative control plasmid, DNase/RNase-free water, and forward and reverse sequencing primers. This kit also contains the pT-REx-DEST30 Gateway™ Vector kit (includes pT-REx-DEST30 and pT-REx/GW-30/lacZ vectors), and the T-RExTM Regulatory Module (includes pcDNA™6/TR and Tetracycline). The Gateway™ LR and BP Clonase™ kits, blasticidin, and pDONRTM221 are included. Store the vectors, buffers, control oligo and plasmids, antibiotics, clonase kits, water, and sequencing primers at –20°C. The One Shot™ box contains transformation reagents including twenty-one 50-μl aliquots of One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli, S.O.C. medium, and a pUC19 supercoiled control plasmid |
| Antal reaktioner | 20 |
| Vektor | BLOCK-iT RNAi vektorer |
| Format | Sæt |
| Gene | GFP (EmGFP) |
| Indhold og opbevaring | BLOCK-iT™ Inducerbart PolII miR RNAi Expression Vector Kit m/EmGFP En kloningsboks med: • Lineariseret ™pcDNA 6.2-GW/EmGFP-miR • Udglødningsbuffer (10X) • T4 DNA Ligase • DNA-ligeringsbuffer (5X) •lacZ kontrol oligo •lacZ kontrolplasmid • Negativt kontrolplasmid • DNase/RNase-frit vand • Frem- og omvendt sekventeringsprimere pT-REx-DEST30 Gateway™ Vektorsæt pT -•REx-DEST30 •pT-REx/GW-30/lacZ T-REx™ vektorer •Reguleringsmodul ™pcDNA •6 /TR Gateway™ Tetracyklin The LR Clonase™ og BP kits, pDONR™ blasticidin og 221 er også inkluderet. Opbevar vektorerne, bufferne, kontrololigo og plasmider, antibiotika, clonase-kits, vand og sekventeringsprimere ved -20 °C. Den ene Shot™ æsken indeholder transformationsreagenser inklusive enogtyve 50-μ L alikvoter af One Shot™ TOP10 Kemisk kompetent E. coli , SOC medium og et pUC19 supercoiled kontrolplasmid. Opbevar disse transformationsreagenser -80 °C. |
| Kloningsmetode | Gateway™ |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.