Få mere at vide
Invitrogen™ BLOCK-iT™ Inducerbart Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP
Beskrivelse
De BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi-ekspressionsvektorsæt kombinerer fordelene ved traditionelle RNAi-vektorer (stabil ekspression og evnen til at bruge viral levering) med muligheder for vævsspecifik ekspression og multiple target-knockdown fra det samme transkript. De BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kits og BLOCK-iT™ Lentiviral Pol II miR RNAi-ekspressionssystemer er designet til at udtrykke kunstige miRNA'er, som er konstrueret til at have 100 % homologi med din målsekvens og vil resultere i målspaltning. Bruger Invitrogen's prisvindende BLOCK-iT™ RNAi Designer, over 70% af konstruktionerne producerer mere end 70% knockdown.
De Invitrogen Pol II ekspressionsfamilie af vektorer omfatter:
- Stærk ekspression fra CMV umiddelbart tidlige promotor, med mulighed for at bruge vævsspecifikke eller andre regulerede promotorer via MultiSite Gateway™ rekombination.
- Kompatibilitet med mange af Invitrogen's Gateway™ destination (DEST) vektorer til genekspression.
- Evne til at kontrollere initieringen af RNAi-responset med en ny BLOCK-iT™ Inducerbart Pol II miR RNAi ekspressionsvektorkit m/EmGFP.
- En ny destinationsvektor i BLOCK-iT™HiPerform™ Lentiviralt PolII miR RNAi-ekspressionssystem med EmGFP. Den nye vektor indeholder en mRNA-stabiliserende sekvens (WPRE) og en nuklear importsekvens (cPPT), som genererer op til 5 gange højere virustitre og EmGFP-ekspressionsniveauer. Derudover udtrykkes blasticidinresistens fra muse-Pgk-1-promotoren for at undgå nedlukning efter flere passager.
- Co-cistronisk ekspression af Emerald GFP (EmGFP), hvilket resulterer i korrelation af EmGFP-ekspression med knockdown fra din miR RNAi.
- Ekspression af mere end én konstrueret miR RNAi-sekvens på det samme transkript, hvilket muliggør knockdown af flere gener samtidigt og generering af syntetiske fænotyper
Den nye BLOCK-iT™ Inducerbart Pol II miR RNAi-ekspressionsvektorkit med EmGFP giver mulighed for at regulere RNAi-eksperimenter. Dette sæt indeholder pT-REx-DEST30 Gateway™ vektor, som efter simple klonings- og shuttling-teknikker producerer en miR RNAi-ekspressionsvektor, der er egnet til inducerbar knockdown. pT-REx-DEST30 Gateway™ vektoren indeholder CMV-promotoren med to kopier af tetracyclinoperatoren (tetO2)-sekvensen, der tillader højt niveau og reguleret ekspression. Dette tillader studiet af tab af funktion i en stabilt transficeret cellelinje, selvom genet af interesse er essentielt. Også induktion af miR RNAi-ekspression kan standses, så fænotypiske ændringer kan måles under gendannelse af genfunktion.
For en række ekspressionsmuligheder kan miR RNAi-kassetten, som indeholder EmGFP (kun pcDNA ™6.2-GW/EmGFP-miR-vektor), miR-flankerende regioner og en miRNA, der er homolog med målet af interesse, let flyttes ind i en række DEST-vektorer. Dette sker igennem Gateway™ rekombinationsreaktioner, hvor miR RNAi-kassetten overføres til en pDONR™ vektor (BP-reaktion) og derefter ind i en DEST-vektor (LR-reaktion) efter eget valg. De HiPerform™ systemet har den nye pLenti6.4/RF R2/V5-DEST destinationsvektor til høje virustitere og EmGFP-ekspression.
Tekniske data
Tekniske data
| Produkttype | RNAi Expression Vector Kit |
| Oversigt | BLOCK-iT™ Inducible Pol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP, 20rxns, Liquid, CMV/TO Promorter, Transfection Delivery Method, Gateway™ Cloning Method, BLOCK-iT RNAi Vectors Type, Inducible System, GFP (EmGFP) Reporter, |
| Til brug med (applikation) | RNAi, epigenetics and non-coding RNA research, vector-based RNAi |
| Inkluderer | The BLOCK-iTTM Inducible PolII miR RNAi Expression Vector Kit w/EmGFP contains a cloning box with linearized pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR, 10X annealing buffer, T4 DNA Ligase, 5X DNA Ligation buffer, lacZ control oligo, lacZ control plasmid, negative control plasmid, DNase/RNase-free water, and forward and reverse sequencing primers. This kit also contains the pT-REx-DEST30 Gateway™ Vector kit (includes pT-REx-DEST30 and pT-REx/GW-30/lacZ vectors), and the T-RExTM Regulatory Module (includes pcDNA™6/TR and Tetracycline). The Gateway™ LR and BP Clonase™ kits, blasticidin, and pDONRTM221 are included. Store the vectors, buffers, control oligo and plasmids, antibiotics, clonase kits, water, and sequencing primers at –20°C. The One Shot™ box contains transformation reagents including twenty-one 50-μl aliquots of One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli, S.O.C. medium, and a pUC19 supercoiled control plasmid |
| Antal reaktioner | 20 |
| Vektor | BLOCK-iT RNAi vektorer |
| Format | Sæt |
| Gene | GFP (EmGFP) |
| Indhold og opbevaring | BLOCK-iT™ Inducerbart PolII miR RNAi Expression Vector Kit m/EmGFP En kloningsboks med: • Lineariseret ™pcDNA 6.2-GW/EmGFP-miR • Udglødningsbuffer (10X) • T4 DNA Ligase • DNA-ligeringsbuffer (5X) •lacZ kontrol oligo •lacZ kontrolplasmid • Negativt kontrolplasmid • DNase/RNase-frit vand • Frem- og omvendt sekventeringsprimere pT-REx-DEST30 Gateway™ Vektorsæt pT -•REx-DEST30 •pT-REx/GW-30/lacZ T-REx™ vektorer •Reguleringsmodul ™pcDNA •6 /TR Gateway™ Tetracyklin The LR Clonase™ og BP kits, pDONR™ blasticidin og 221 er også inkluderet. Opbevar vektorerne, bufferne, kontrololigo og plasmider, antibiotika, clonase-kits, vand og sekventeringsprimere ved -20 °C. Den ene Shot™ æsken indeholder transformationsreagenser inklusive enogtyve 50-μ L alikvoter af One Shot™ TOP10 Kemisk kompetent E. coli , SOC medium og et pUC19 supercoiled kontrolplasmid. Opbevar disse transformationsreagenser -80 °C. |
| Kloningsmetode | Gateway™ |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Dit input er vigtigt for os. Udfyld denne formular for at give feedback relateret til indholdet på dette produkt.