missing translation for 'onlineSavingsMsg'
Få mere at vide
Få mere at vide
Invitrogen™ Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ Kloningssæt
Klicka för att se tillgängliga alternativ
Antal reaktioner:
20
Förpackningsstorlek:
Hver
Beskrivning
Bac-to-Bac™ Baculovirusekspression er en effektiv metode til fremstilling af baculovirus til proteinekspression på højt niveau i insektceller. Den er afhængig af generering af rekombinant virus ved stedspecifik transposition i E. coli (DH10Bac™ ) snarere end homolog rekombination i insektceller. Den nye pFastBac™ HBM TOPO™ vektor muliggør secerneret proteinekspression, fordi den har honningbien melittin (HBM ) sekretionssignal. Den nye vektor bør overvejes kraftigt til ekspression af glycoproteiner. Glycoproteiner kan ikke glycosyleres i fravær af noget sekretionssignal. I modsætning til glycoproteiner udskilt fra pattedyrceller kan glycoproteiner udskilt fra baculovirus let deglycosyleres in vitro. Dette er en meget vigtig funktion for at krystallisere proteiner!
De pFastBac™ HBM TOPO™ vektor har også en C-terminal His-Tag med et TEV-spaltningssignal for at muliggøre nem oprensning af histidinfusionsproteiner på nikkelchelaterende harpikser (ProBond™ Purification System) og native proteiner ved hjælp af AcTev™ protease.
Vektoren bruger den stærke polyhedrinpromotor til at generere høje ekspressionsniveauer i en række insektcellelinjer såsom Sf9, Mimic™ Sf9, Sf21 og High Five™ celler i Sf-900 II& Sf-900™ III medier fra Gibco .
Traditionelle baculovirussystemer kræver oprensning og amplifikation af en initial lavtiter viral supernatant. Dette kræver en tidskrævende plakanalyse. Bac-to-™Bac's pFastBac™ vektorer rekombinerer imidlertid med moderbacmidet i DH10Bac™ E. coli-kompetente celler til at danne et ekspressionsbacmid. Transficer bacmidet ind i insektceller for hurtig produktion af en høj titer af rene rekombinante baculoviruspartikler i den allerførste transfektion. Du sparer ugers kostbar tid. Saml en ren P2-baculovirus-stam på dag 10 uden behov for kedelige plaques-assay.
De pFastBac™ HBM TOPO™ vektor har også en C-terminal His-Tag med et TEV-spaltningssignal for at muliggøre nem oprensning af histidinfusionsproteiner på nikkelchelaterende harpikser (ProBond™ Purification System) og native proteiner ved hjælp af AcTev™ protease.
Vektoren bruger den stærke polyhedrinpromotor til at generere høje ekspressionsniveauer i en række insektcellelinjer såsom Sf9, Mimic™ Sf9, Sf21 og High Five™ celler i Sf-900 II& Sf-900™ III medier fra Gibco .
Traditionelle baculovirussystemer kræver oprensning og amplifikation af en initial lavtiter viral supernatant. Dette kræver en tidskrævende plakanalyse. Bac-to-™Bac's pFastBac™ vektorer rekombinerer imidlertid med moderbacmidet i DH10Bac™ E. coli-kompetente celler til at danne et ekspressionsbacmid. Transficer bacmidet ind i insektceller for hurtig produktion af en høj titer af rene rekombinante baculoviruspartikler i den allerførste transfektion. Du sparer ugers kostbar tid. Saml en ren P2-baculovirus-stam på dag 10 uden behov for kedelige plaques-assay.
Specifikationer
Specifikationer
| Cellelinje | Høj Five™ , Sf21, Sf9 |
| Celletype | Insektcelle |
| Kloningsmetode | Stump TOPO |
| Spaltning | TEV Protease-genkendelsessted |
| Indhold og opbevaring | Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ Kloningssættet indeholder: (For detaljer se manualen) • Vektorsæt til 20 topo-kloningsreaktioner • pFastBac ⁄HBM TOPO™ Vektor indeholdende den C-terminale TEV-spaltning sidder og His-Tag . • pFastBac ⁄CT-Gus kontrolplasmid (kontrolekspressionsvektor) • Andre medfølgende reagenser: 10x PCR, dNTP Mix, Saltopløsning, Sterilt Vand, Kontrol PCR skabelon, Polyhedrin Forward Primer, SV40 pA Reverse Primer • Kit indeholdende kompetente celler (20 reaktioner): • En Shot™ Mach1-T1R Kemisk Kompetent E. coli Vector kit: opbevares ved -20 °C One Shot™ Mach1-T1R kemisk kompetent E. coli: opbevares ved -80 °C |
| Format | Sæt |
| Udtryksmekanisme | Cellebaseret ekspression |
| Udtrykssystem | Baculovirus |
| Til brug med (applikation) | Proteinekspression |
| High-throughput kompatibilitet | High-throughput-kompatibel, ikke High-throughput-kompatibel (manuel) |
| Visa mer |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Korrigering av produktinnehåll
Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.
Produkttitel
Hittar du en möjlighet till förbättring?Dela en innehållskorrigering