missing translation for 'onlineSavingsMsg'
Få mere at vide
Få mere at vide
Invitrogen™ Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ Kloningssæt
Beskrivelse
Bac-to-Bac™ Baculovirusekspression er en effektiv metode til fremstilling af baculovirus til proteinekspression på højt niveau i insektceller. Den er afhængig af generering af rekombinant virus ved stedspecifik transposition i E. coli (DH10Bac™ ) snarere end homolog rekombination i insektceller. Den nye pFastBac™ HBM TOPO™ vektor muliggør secerneret proteinekspression, fordi den har honningbien melittin (HBM ) sekretionssignal. Den nye vektor bør overvejes kraftigt til ekspression af glycoproteiner. Glycoproteiner kan ikke glycosyleres i fravær af noget sekretionssignal. I modsætning til glycoproteiner udskilt fra pattedyrceller kan glycoproteiner udskilt fra baculovirus let deglycosyleres in vitro. Dette er en meget vigtig funktion for at krystallisere proteiner!
De pFastBac™ HBM TOPO™ vektor har også en C-terminal His-Tag med et TEV-spaltningssignal for at muliggøre nem oprensning af histidinfusionsproteiner på nikkelchelaterende harpikser (ProBond™ Purification System) og native proteiner ved hjælp af AcTev™ protease.
Vektoren bruger den stærke polyhedrinpromotor til at generere høje ekspressionsniveauer i en række insektcellelinjer såsom Sf9, Mimic™ Sf9, Sf21 og High Five™ celler i Sf-900 II& Sf-900™ III medier fra Gibco .
Traditionelle baculovirussystemer kræver oprensning og amplifikation af en initial lavtiter viral supernatant. Dette kræver en tidskrævende plakanalyse. Bac-to-™Bac's pFastBac™ vektorer rekombinerer imidlertid med moderbacmidet i DH10Bac™ E. coli-kompetente celler til at danne et ekspressionsbacmid. Transficer bacmidet ind i insektceller for hurtig produktion af en høj titer af rene rekombinante baculoviruspartikler i den allerførste transfektion. Du sparer ugers kostbar tid. Saml en ren P2-baculovirus-stam på dag 10 uden behov for kedelige plaques-assay.
De pFastBac™ HBM TOPO™ vektor har også en C-terminal His-Tag med et TEV-spaltningssignal for at muliggøre nem oprensning af histidinfusionsproteiner på nikkelchelaterende harpikser (ProBond™ Purification System) og native proteiner ved hjælp af AcTev™ protease.
Vektoren bruger den stærke polyhedrinpromotor til at generere høje ekspressionsniveauer i en række insektcellelinjer såsom Sf9, Mimic™ Sf9, Sf21 og High Five™ celler i Sf-900 II& Sf-900™ III medier fra Gibco .
Traditionelle baculovirussystemer kræver oprensning og amplifikation af en initial lavtiter viral supernatant. Dette kræver en tidskrævende plakanalyse. Bac-to-™Bac's pFastBac™ vektorer rekombinerer imidlertid med moderbacmidet i DH10Bac™ E. coli-kompetente celler til at danne et ekspressionsbacmid. Transficer bacmidet ind i insektceller for hurtig produktion af en høj titer af rene rekombinante baculoviruspartikler i den allerførste transfektion. Du sparer ugers kostbar tid. Saml en ren P2-baculovirus-stam på dag 10 uden behov for kedelige plaques-assay.
Tekniske data
Tekniske data
| Cellelinje | Høj Five™ , Sf21, Sf9 |
| Celletype | Insektcelle |
| Kloningsmetode | Stump TOPO |
| Spaltning | TEV Protease-genkendelsessted |
| Indhold og opbevaring | Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ Kloningssættet indeholder: (For detaljer se manualen) • Vektorsæt til 20 topo-kloningsreaktioner • pFastBac ⁄HBM TOPO™ Vektor indeholdende den C-terminale TEV-spaltning sidder og His-Tag . • pFastBac ⁄CT-Gus kontrolplasmid (kontrolekspressionsvektor) • Andre medfølgende reagenser: 10x PCR, dNTP Mix, Saltopløsning, Sterilt Vand, Kontrol PCR skabelon, Polyhedrin Forward Primer, SV40 pA Reverse Primer • Kit indeholdende kompetente celler (20 reaktioner): • En Shot™ Mach1-T1R Kemisk Kompetent E. coli Vector kit: opbevares ved -20 °C One Shot™ Mach1-T1R kemisk kompetent E. coli: opbevares ved -80 °C |
| Format | Sæt |
| Udtryksmekanisme | Cellebaseret ekspression |
| Udtrykssystem | Baculovirus |
| Til brug med (applikation) | Proteinekspression |
| High-throughput kompatibilitet | High-throughput-kompatibel, ikke High-throughput-kompatibel (manuel) |
| Vis mere |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Produkttitel
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.
Ser du en mulighed for forbedring?