Invitrogen™ Annexin V Ready Flow-konjugater til apoptosedetektion

Annexin V-konjugater giver hurtige og pålidelige detektionsmetoder til undersøgelse af eksternalisering af phosphatidylserin, en indikator for mellemstadier af apoptose. Forskellen i fluorescensintensitet mellem apoptotiske og ikke-apoptotiske celler farvet med vores fluorescerende annexin V-konjugater, som målt ved flowcytometri, er typisk omkring 100 gange.

Annexin V Ready Flow-konjugaterne leveres som klar-til-brug, direkte-til-prøve apoptotiske cellefarvninger. Tilsæt blot en dråbe fra dråbeflasken direkte i 1 x 106 celler i 5 mM Ca2+-holdigt cellekulturmedium eller annexinbindingsbuffer (kat. nr. V13246 eller BMS500BB), inkuber og analyser. Den traditionelle annexinfarvningsprotokol kan bruges som en alternativ metode ved at erstatte tilføjelsen af 5μ L annexin-konjugat med tilsætning af 1 dråbe fra Ready Flow-dråbeflasken.

Annexin V Alexa Fluor 488-konjugat er exciterbar ved 495 nm med en emissionstop ved 519 nm.
Annexin V Alexa Fluor 647-konjugat er exciterbart ved 650 nm med en emissionstop ved 665 nm.
Annexin V APC-konjugatet er exciterbart ved 650 nm med en emissionstop ved 660 nm.
Annexin V Pacific Blue konjugat er exciterbart ved 410 nm med en emissionstop ved 455 nm.
Annexin V-farvning til påvisning af apoptotiske celler kan kun udføres på levende celler og væv. Hvis prøver skal fikseres efter farvning, er der specifikke betingelser, der kræves for at opnå forbigående bibeholdelse af signal. Disse omfatter brug af en alkoholfri, aldehyd-baseret fikseringsmetode, brug af buffere indeholdende Ca2+ og undgåelse af overfladeaktive stoffer/rengøringsmidler. For nemheds skyld tilbyder vi også en koncentreret annexinbindende buffer, der letter bindingen af annexin V til phosphatidylserin i apoptoseassays.