Invitrogen™ RNA senere™ stabiliseringsopløsning

RNAlater RNA-stabiliseringsopløsning stabiliserer og beskytter cellulært RNA i intakte, ufrosne vævsprøver, hvilket eliminerer behovet for straks at behandle vævsprøver eller at fryse prøver i flydende nitrogen til senere behandling. Vævsstykker kan høstes og nedsænkes i RNA later RNA-stabiliseringsopløsning til opbevaring uden at bringe kvaliteten eller mængden af RNA i fare efter efterfølgende RNA-isolering. Fordele ved at bruge RNA later RNA-stabiliseringsløsning:

• Effektivitet—stabiliserer RNA i 1 dag ved 37°C, 1 uge ved 25°C, 1 måned ved 4°C eller på°ubestemt tid ved -20°C
• Enkelthed —et enkelt reagens, der øjeblikkeligt inaktiverer RNaser og stabiliserer RNA i væv eller celler
• Bekvemt —ingen grund til at fryse prøver i flydende nitrogen eller haste prøver tilbage til laboratoriefryseren
• Mobilitet —perfekt til vævsopsamling 'i marken'
• Alsidighed —kompatibel med mange RNA-isoleringsprocedurer, inklusive de fleste RNA-isoleringssæt

Anvendelser
RNAlater RNA-stabiliseringsopløsning er blevet testet på en række pattedyrsvæv, planter, E. coli, Xenopus, fisk og Drosophila. Den er ideel til:

• Beskyttelse af RNA-integritet i væv rigt på RNaser
• Indsamling af prøver fra forskellige tidspunkter uden at skulle behandle prøverne fra hvert tidspunkt med det samme
• Arkivering af væv til fremtidig mikrodissektion
• Nedsænkning af dyrs hulrum eller organer for at stabilisere RNA under lange dissektionsprocedurer
• Indsamling af prøver på steder (f.eks. hospitaler, feltsteder, rumfærger), hvor øjeblikkelig RNA-isolering ikke er mulig
• Forsendelse af prøver på våd is eller endda ved stuetemperatur, hvis de sendes fra dag til dag

RNA later RNA-stabiliseringsopløsningsprocedure
Det dissekerede væv (mindre end 0,5 cm i en hvilken som helst dimension) nedsænkes simpelthen i ca. 5 volumener af RNAlater -opløsning ved stuetemperatur. Opløsningen gennemtrænger cellerne og stabiliserer RNA'et. Prøven kan derefter opbevares på ubestemt tid ved -20°C (vævet fryser ikke), ved 4°C i op til en måned eller ved 25°C i op til en uge. Til RNA-isolering fjernes vævet simpelthen fra RNA later -opløsningen og behandles, som om det lige var blevet høstet. De fleste væv kan overføres direkte til en lyseringsbuffer og homogeniseres. Prøver behandlet med RNA later -opløsning og derefter frosset kan males med morter og støder eller optøs og behandles som frisk væv uden bekymring for cellebrud og frigivelse af RNaser, da RNaserne allerede er blevet inaktiveret. Celler kan spindes ud og derefter tilføjes til lyseringsbuffer, eller i nogle tilfælde kan RNA later -opløsning tilsættes sammen med cellerne direkte til lyseringsbufferen.

Kompatibel med en række procedurer
RNAlater RNA-stabiliseringsopløsning er kompatibel med et-trins RNA-isoleringsmetoder, såsom TRIzol-reagens; med glasbindingsmetoder, såsom Qiagens RNeasy eller Ambion RNAqueous-sæt; med syrefenolekstraktionsmetoder, såsom Ambion ToTALLY RNA-sæt; og med metoder, der bruger oligo(dT)-udvælgelse af mRNA, såsom Ambion Poly(A)Purist™-sæt. Intern forskning samt nyligt offentliggjort uafhængig forskning viser, at brugen af RNAlater RNA-stabiliseringsløsning til vævsopbevaring ikke påvirker resultatet af efterfølgende RNA-ekspressionsanalyseeksperimenter sammenlignet med andre behandlingsmetoder.