Invitrogen™ RNA senere -™ICE Frozen Tissue Transition Solution

RNAlater-ICE er et nyt reagens til at overføre frosset væv til en tilstand, der let kan behandles til ekstraktion af RNA af høj kvalitet. Frosne væv nedsænkes simpelthen i RNAlater-ICE og får lov til at optø natten over ved -20 °C. Når de er optøet, kan vævene behandles som friske væv ved hjælp af standard RNA-isoleringsprocedurer. Ikke mere besværlig slibning af frosset væv for at beskytte RNA'et.

•Behandl tidligere frosne væv som frisk høstede prøver
• Optøning af væv i RNAlater-ICE beskytter RNA mod nedbrydning
• Ikke mere vævspulverisering med morter og støder og akavet overførsel af pulver til rør
• Fordel let frosne vævsprøver til flere eksperimenter
• Hurtigfrysning af væv

bevarer RNA Ofte er væv, der skal opbevares før RNA-isolering,“ snap” eller“ blitz” frosset på tøris eller i flydende nitrogen for at bevare RNA-integriteten. RNA i væv er stabilt, mens det er frosset °ved -80 C, men optøning af vævet før eller under dets afbrydelse kan resultere i RNA-nedbrydning. Dette gælder, selvom vævet optøs, mens det er i denatureringsopløsningen.

Det er problematisk at behandle frosne væv
Frosne væv males typisk med en afkølet morter og støder for at bevare RNA-kvaliteten. Flydende nitrogen skal tilsættes til mørtlen for at holde prøven frosset, mens den males. For flere prøver er denne proces besværlig. Enten er der behov for et separat morter- og stødersæt til hver prøve, eller også skal sættet optøs og renses efter hver prøve er behandlet for at undgå krydskontaminering. Pulveriseret væv kan også tø op under overførsel til en homogeniseringsbeholder. Dette resulterer ofte i dannelse af klumper, der ikke let spredes i lysisopløsningen, hvilket resulterer i RNA-nedbrydning og -tab. Meget små prøver bør homogeniseres straks i lyseringsopløsning, hvilket igen kan være besværligt, hvis der er flere prøver at behandle.

Bearbejd frosset væv uden at bringe RNA-integritet i fare
RNAlater-ICE løser alle disse problemer. Du skal blot nedsænke frosne vævsprøver i 10 volumener RNAlater-ICE og opbevare natten over °ved -20 C (opløsningen forbliver flydende ved disse temperaturer). Når vævet optøs, beskyttes RNA-integriteten. Når først det er behandlet, kan væv °opbevares sikkert ved 4 C eller endda ved stuetemperatur (i en begrænset periode) og kan dissekeres eller behandles yderligere før homogenisering i en standard RNA-isoleringslysebuffer. Den samme frosne vævsprøve kan således bruges flere gange til forskellige eksperimenter uden at kompromittere RNA-integriteten.